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產(chan) 品名稱：人毛囊幹細胞
貨號：GOY-01X1366
分類：原代細胞
2.組織來源：毛囊組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：人毛囊幹細胞分離自皮膚毛囊組織；毛囊是表皮細胞連續形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭，中心是一根毛發，立毛肌的一側(ce) 斜附在毛囊壁上，附著點的上方為(wei) 皮脂腺通入毛囊的短頸，毛囊在皮膚表麵的開口是毛囊孔。毛囊位於(yu) 真皮和皮下組織中，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度，它是由包繞毛發與(yu) 表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個(ge) 結構比較複雜的器官附件組織。毛囊幹細胞是在人的毛囊外根鞘隆突部中的一種細胞。毛囊幹細胞屬於(yu) 成體(ti) 幹細胞，在體(ti) 內(nei) 處於(yu) 靜止狀態，在體(ti) 外培養(yang) 作用下表現出驚人的增殖能力。研究發現，毛囊幹細胞具有多向分化潛能，它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺，參與(yu) 皮膚創傷(shang) 愈合的過程。毛囊幹細胞和其它成體(ti) 幹細胞一樣，具有慢周期性、未分化性、自我更新和體(ti) 外增殖能力強等特點。毛囊幹細胞分化經毛囊幹細胞（hair follicle stem cells，FSC）、短暫增殖細胞（transit amplifying cells，TAC）有絲(si) 分裂後分化細胞（postmitotic differentiating cells，PDC）三個(ge) 階段。毛囊幹細胞在光鏡下呈立方形，細胞體(ti) 積小，核漿比率大，表麵光滑，皺褶少，又被稱為(wei) 非鋸齒形細胞，細胞體(ti) 積的增大與(yu) 增殖能力呈負相關(guan) 。超微結構顯示細胞表麵有少許微絨毛，細胞核存在許多卷曲，染色質彌散分布，這些形態特征均表現出原始細胞的特性。
5.方法簡介：公司實驗室分離的人毛囊幹細胞采用膠原酶-聯合消化製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的人毛囊幹細胞經CK19、CD200免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次； 生長特性 貼壁 細胞形態 梭形、多角形 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 3-5代左右； 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
人毛囊幹細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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