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產(chan) 品名稱：小鼠胃平滑肌細胞
貨號：GOY-01X1367
分類：原代細胞
2.組織來源：胃組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：小鼠胃平滑肌細胞分離自胃組織；胃柔軟，活體(ti) 呈橘紅色。胃空虛時形成許多皺襞，充盈時變平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構成。粘膜上皮為(wei) 柱狀上皮。上皮向粘膜深部下陷構成大量腺體(ti) （胃底腺、賁門腺、幽門腺），它們(men) 的分泌物混合形成胃液，對食物進行化學性消化。粘膜在幽門處由於(yu) 覆蓋幽門括約肌的表麵而形成環狀的皺襞叫幽門瓣。胃肌膜由三層平滑肌構成，外層縱形，中層環形，內(nei) 層斜行，其中環形肌發達，在幽門處特別增厚形成幽門括約肌。胃平滑肌細胞源自胃的平滑肌層，細胞通過緊密連接，進行同步性運動，完成肌肉的舒縮活動，以推動食物前進，完成對食物的機械性消化，並促進化學性消化和吸收。胃平滑肌具有肌組織的共同特性，如興(xing) 奮、自律性、傳(chuan) 導性和收縮性，在離體(ti) 後，置於(yu) 適宜的環境內(nei) ，仍能進行良好的節律性運動，但其收縮很緩慢，節律性遠不如心肌規則。胃平滑肌對電刺激較不敏感，但對於(yu) 牽張、溫度和化學刺激則特別敏感，輕微的刺激常可引起強烈的收縮。胃平滑肌的這一特性是與(yu) 它所處的生理環境分不開的，胃內(nei) 容物對平滑肌的牽張、溫度和化學刺激是引起內(nei) 容物推進或排空的自然刺激因素。
5.方法簡介：公司實驗室分離的小鼠胃平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的小鼠胃平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 1-2代 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
小鼠胃平滑肌細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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