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產(chan) 品分類
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產(chan) 品名稱：大鼠腎上腺皮質細胞
貨號：GOY-01X1365
分類：原代細胞
2.組織來源：腎上腺組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：大鼠腎上腺皮質細胞分離自腎上腺組織；腎上腺是人體(ti) 相當重要的內(nei) 分泌器官，由於(yu) 位於(yu) 兩(liang) 側(ce) 腎髒的上方，故名腎上腺。腎上腺左右各一，位於(yu) 腎的上方，共同為(wei) 腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形，右腎上腺為(wei) 三角形。從(cong) 側(ce) 麵觀察，腺體(ti) 分腎上腺皮質和腎上腺髓質兩(liang) 部分，周圍部分是皮質，內(nei) 部是髓質。腎上腺內(nei) 部是髓質部分，分泌腎上腺素。這些激素在應激狀態釋放增多，能夠幫助升高血壓，加快心率，升高血糖，動員全身的儲(chu) 備物質，為(wei) 機體(ti) 與(yu) 外界環境的抗爭(zheng) 作好充分準備。腎上腺外部是皮質部分，分泌醛固酮、和少量的雌雄激素。醛固酮能夠促進小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收，正常數量的醛固酮，對維持人體(ti) 正常血壓有重要作用。但是如果過多分泌，會(hui) 導致高血壓和低血鉀。是人體(ti) 必需的激素之一。當人體(ti) 處於(yu) 應激狀態時，比如感冒，發燒，遇到突發事件的時候，腎上腺皮質分泌大量的，這些能夠動員機體(ti) 的存儲(chu) 能源，為(wei) 應對內(nei) 部或者外部重要事件提供充分的物質準備。當缺乏時，機體(ti) 在遇到重大事件的時候，往往缺乏足夠應對能力，容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產(chan) 生的雄激素，對男性來講，並非，但是對女性而言，是雄激素的一個(ge) 重要來源。
5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠腎上腺皮質細胞采用膠原酶消化法製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的大鼠腎上腺皮質細胞經3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息：包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 梭形、多角形 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 1-3代左右；2代以內(nei) 狀態 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
大鼠腎上腺皮質細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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