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產(chan) 品分類
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產(chan) 品名稱：小鼠肝非實質細胞
貨號：GOY-01X1389
分類：原代細胞
2.組織來源：肝組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：小鼠肝非實質細胞分離自肝髒組織；肝髒是身體(ti) 內(nei) 以代謝功能為(wei) 主的一個(ge) 器官，並在身體(ti) 裏麵起著去氧化、儲(chu) 存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝髒也製造消化係統中之膽汁。肝髒是機體(ti) 內(nei) 髒裏的器官，位於(yu) 機體(ti) 中的腹部位置，在右側(ce) 橫隔膜之下，位於(yu) 膽囊之前端且於(yu) 右邊腎髒的前方，胃的上方。肝髒是機體(ti) 消化係統中的消化腺，為(wei) 一紅棕色的V字形器官。肝髒是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝髒在機體(ti) 位置和形態結構：肝髒位於(yu) 右上腹，隱藏在右側(ce) 膈下和肋骨深麵，大部分肝為(wei) 肋弓所複蓋，僅(jin) 在腹上區、右肋弓間露出並直接接觸腹前壁，肝上麵則與(yu) 膈及腹前壁相接。肝實質細胞具有肝功能的單位，是肝髒的基本組成單位之一。肝非實質細胞是指除了肝實質細胞之外的細胞，主要包含了肝竇內(nei) 皮細胞、肝星狀細胞、肝枯否細胞。
5.方法簡介：公司實驗室分離的小鼠肝非實質細胞采用取肝髒灌流、膠原酶消化、密度梯度離心法製備而來製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的小鼠肝非實質細胞經過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 懸浮 細胞形態 圓形 傳(chuan) 代特性 不增殖；不傳(chuan) 代 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
小鼠肝非實質細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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