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產(chan) 品分類
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產(chan) 品名稱：大鼠胎盤間充質幹細胞
貨號：GOY-01X1388
分類：原代細胞
2.組織來源：胎盤組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：大鼠胎盤間充質幹細胞細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體(ti) 子宮內(nei) 膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒(er) 在子宮中發育，依靠胎盤從(cong) 母體(ti) 取得營養(yang) ，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產(chan) 生多種維持妊娠的激素，是一個(ge) 重要的內(nei) 分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖後代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲(si) 等與(yu) 母體(ti) 組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。胎盤間充質幹細胞（mesenchymal stem cell，MSC）是一種多能幹細胞，是具有自我複製能力的多潛能細胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細胞像APSC多能細胞。在胚胎發育中來源於(yu) 中胚層。在機體(ti) 正常的組織損傷(shang) 修複過程中，MSC是一種重要的參與(yu) 組織再生的細胞庫。在組織損傷(shang) 引起的特殊信號作用下，MSC遷移到受損部位，在局部聚集增殖，依據不同的損傷(shang) 信號沿著不同途徑分化。MSC易於(yu) 分離擴增，體(ti) 外倍增能力旺盛，能保持其多向分化能力。因此，MSC是一種實用的組織修複種子細胞。相較於(yu) 其他幹細胞，胎盤間充質幹細胞具有來源方便，細胞數量充足，易於(yu) 分離、培養(yang) 、擴增和純化，傳(chuan) 代擴增多代後仍具有幹細胞特性。胎盤是幹細胞的來源。
5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠胎盤間充質幹細胞采用-膠原酶聯合消化法製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的大鼠胎盤間充質幹細胞經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
大鼠胎盤間充質幹細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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