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產(chan) 品名稱：大鼠臍帶間充質幹細胞
貨號：GOY-01X1386
分類：原代細胞
2.組織來源：臍帶組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：大鼠臍帶間充質幹細胞分離自臍帶；臍帶是哺乳類的連接胎兒(er) 和胎盤的管狀結構。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸係膜動脈及臍腸係膜靜脈。當卵黃囊及其血管退化，臍動脈和臍靜脈就發達起來，在這些間隙中可以看到疏鬆的膠狀的間充質。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體(ti) 部分出的毛細血管，與(yu) 胎盤的子體(ti) 部胎兒(er) 毛細血管靠近，在此處母體(ti) 和胎兒(er) 的血液間進行CO2和O2，代謝產(chan) 物即代謝廢物和營養(yang) 物質的交換。臍動脈將胎兒(er) 來的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yang) 物質從(cong) 胎盤運送給胎兒(er) 。後由子宮靜脈將來自胎兒(er) 的代謝廢物運走，某種激素和抗體(ti) 等也通過臍帶從(cong) 母體(ti) 移交給胎兒(er) 。臍帶中含有大量的幹細胞，幹細胞是生命的種子，它會(hui) 分化成機體(ti) 的各種細胞，結出各種不同的果實——血液細胞、神經細胞、骨骼細胞等。幹細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體(ti) ；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量，又可進一步分化為(wei) 各種組織細胞，從(cong) 而在組織修複等方麵發揮積極作用。間充質幹細胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的幹細胞。在不同的誘導條件下，可分化為(wei) 多種造血細胞以外的組織細胞，並具有造血支持、免疫調節、組織修複等作用；目前，多用於(yu) 風濕免疫疾病的治療。間充質幹細胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體(ti) 幹細胞，存在於(yu) 骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒(er) 組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子，促進造血幹細胞（HSC）的增殖與(yu) 分化。MSCs還具有免疫調節、抗炎和組織修複作用，可減輕移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相關(guan) 並發症。
5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠臍帶間充質幹細胞采用組織貼塊法製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的大鼠臍帶間充質幹細胞經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
大鼠臍帶間充質幹細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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