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產(chan) 品名稱：人肺大靜脈內(nei) 皮細胞
貨號：GOY-01X0691
規格：5×10⁵Cells/T25培養(yang) 瓶
分類：原代細胞
2.組織來源：肺靜脈組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：人肺大靜脈內(nei) 皮細胞分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心髒的靜脈，是一個(ge) 靜脈裏流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩(liang) 條連接右肺，兩(liang) 條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與(yu) 左心房連接，而與(yu) 右心房或體(ti) 靜脈係統連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由於(yu) 肺靜脈內(nei) 血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環具有血壓低、阻力小和順應性大的特點，肺動脈壓力高低取決(jue) 於(yu) 單位時間內(nei) 肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環的低壓、低阻的狀態，必須保證整個(ge) 肺循環係統的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經過左心室收縮進入體(ti) 循環，才能避免肺動脈內(nei) 壓力升高。細胞呈多邊形鵝卵石狀排列；該細胞在維持血管內(nei) 外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。
5.方法簡介：公司實驗室分離的人肺大靜脈內(nei) 皮細胞采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、並通過內(nei) 皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的人肺大靜脈內(nei) 皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 內(nei) 皮細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 2-3代 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
人肺大靜脈內(nei) 皮細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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