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產(chan) 品名稱：小鼠氣管上皮細胞
貨號：GOY-01X0692
規格：5×10⁵Cells/T25培養(yang) 瓶
分類：原代細胞
2.組織來源：氣管
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：小鼠氣管上皮細胞分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為(wei) 後壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與(yu) 環狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體(ti) （相當胸骨角平麵）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為(wei) 氣管杈。氣管主要由14-16個(ge) 半環狀軟骨構成，有彈性，軟骨為(wei) “C”字形的軟骨環，缺口向後，各軟骨環以韌帶連接起來，環後方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接，保持了持續張開狀態。管腔襯以粘膜，表麵覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與(yu) 灰塵排出，以淨化吸入的氣體(ti) 。氣管上皮是氣道與(yu) 外界環境接觸的道防線，不僅(jin) 是各種病原體(ti) 、炎症介質作用的靶細胞，還作為(wei) 效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子從(cong) 而參與(yu) 氣道炎症及免疫反應。體(ti) 外培養(yang) 的原代氣管上皮細胞因與(yu) 體(ti) 內(nei) 組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性，因此，在基礎及臨(lin) 床研究中極為(wei) 重要。
5.方法簡介：公司實驗室分離的小鼠氣管上皮細胞采用鏈黴-中性混合消化法結合差速貼壁法，並通過上皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的小鼠氣管上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息：包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 上皮細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 1-2代 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
小鼠氣管上皮細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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