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產(chan) 品分類
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產(chan) 品名稱：豬脂肪細胞
貨號：GOY-01X0687
規格：5×10⁵Cells/T25培養(yang) 瓶
分類：原代細胞
2.組織來源：脂肪組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：豬脂肪細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏鬆結締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經血液輸送到各組織以供利用。它們(men) 影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nei) 皮功能、纖溶活動及炎症反應，參與(yu) 多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為(wei) 能量儲(chu) 存的器官而成為(wei) 一個(ge) 極其重要的內(nei) 分泌係統。脂肪細胞分為(wei) 白色脂肪細胞和褐色（棕色）脂肪細胞，常呈白色，在嬰幼兒(er) 期大量增殖，到青春期數量達到，此後數量一般不再增加。細胞內(nei) 含有大量富含脂肪的小泡，稱為(wei) 脂質泡，富含光麵內(nei) 質網。此外，還有一種褐色脂肪細胞，在動物體(ti) 內(nei) 主要存在於(yu) 肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎髒周圍，含有高度團縮的褐色脂肪，作用是將脂質分解產(chan) 熱，調節體(ti) 內(nei) 脂質比例。
5.方法簡介：公司實驗室分離的豬脂肪細胞采用消化法製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的豬脂肪細胞經油紅O染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 梭形、多角形 傳(chuan) 代特性 屬於(yu) 終末分化細胞；屬於(yu) 不增殖細胞群 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
豬脂肪細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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