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產(chan) 品名稱：大鼠下丘腦神經元細胞
貨號：GOY-01X1374
分類：原代細胞
2.組織來源：腦組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：大鼠下丘腦神經元細胞分離自下丘腦；下丘腦又稱丘腦下部，位於(yu) 大腦腹麵、丘腦的下方，是調節內(nei) 髒活動和內(nei) 分泌活動的較高級神經中樞所在。下丘腦自前向後可分三部﹐即前部（又名視前區和視上區）﹑中部（結節區）和後部（乳頭體(ti) 區）。下丘腦具有許多細胞核團和纖維束﹐與(yu) 中樞神經係統的其它部位具有密切的相互聯係。它不僅(jin) 通過神經和血管途徑調節腦垂體(ti) 前﹑後葉激素的分泌和釋放﹐而且還參與(yu) 調節自主神經係統﹐如控製水鹽代謝﹑調節體(ti) 溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內(nei) 髒活動以及情緒等。下丘腦神經元與(yu) 來自其他部位的神經纖維有廣泛的突觸聯係，可以接受很多神經衝(chong) 動，為(wei) 內(nei) 分泌係統和神經係統的中心。它們(men) 能調節垂體(ti) 前葉功能，合成神經垂體(ti) 激素及控製自主神經和植物神經功能。故提取下丘腦神經元進行體(ti) 外培養(yang) ，建立下丘腦神經元體(ti) 外實驗平台具有重要意義(yi) 。
5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠下丘腦神經元細胞采用消化法結合神經元專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 、化學試劑抑製法篩選製備而來，細胞總量約為(wei) 5×105cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的大鼠下丘腦神經元細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml） 培養(yang) 基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 神經元細胞樣 傳(chuan) 代特性 屬於(yu) 終末分化細胞；屬於(yu) 不增殖細胞群 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
大鼠下丘腦神經元細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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