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產(chan) 品名稱：大鼠子宮內(nei) 膜基質細胞
貨號：GOY-01X1362
分類：原代細胞
2.組織來源：子宮組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：大鼠子宮內(nei) 膜基質細胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒(er) 的器官，位於(yu) 盆腔中部，膀胱與(yu) 直腸之間，其位置可隨膀胱與(yu) 直腸的充盈程度或體(ti) 位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(hui) 陰中心腱等結構維持，這些結構受損或鬆弛時，可以引起子宮脫垂。子宮內(nei) 膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細胞和纖毛細胞二種）和固有膜（由結締組織構成，其內(nei) 有大量的星形細胞，稱為(wei) 基質細胞）組成，子宮內(nei) 膜可分為(wei) 淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nei) 膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nei) 膜上皮細胞主要功能：①子宮內(nei) 膜亦稱子宮黏膜，是指構成哺乳類子宮內(nei) 壁的一層；②子宮內(nei) 膜對動情素和孕激素都起反應，因此可隨著性周期（發情周期、月經周期）發生顯著的變化。子宮內(nei) 膜與(yu) 胚胎附植密切相關(guan) ，在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與(yu) 母體(ti) “對話”的過程中，子宮內(nei) 膜上皮細胞充當了極其重要的角色。子宮內(nei) 膜構成雌性哺乳動物子宮壁的內(nei) 層，位於(yu) 子宮腔麵，在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nei) 膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nei) 膜的再生修複是子宮的重要生理功能。體(ti) 外培養(yang) 的子宮內(nei) 膜上皮細胞對於(yu) 研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義(yi) 。
5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠子宮內(nei) 膜基質細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的大鼠子宮內(nei) 膜基質細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 3代左右 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
大鼠子宮內(nei) 膜基質細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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