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產(chan) 品名稱：大鼠棕色脂肪幹細胞
貨號：GOY-01X1345
分類：原代細胞
2.組織來源：脂肪組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：大鼠棕色脂肪幹細胞分離自棕色脂肪組織；動物體(ti) 內(nei) 存在棕色和白色兩(liang) 種脂肪，白色脂肪堆積在皮下，負責儲(chu) 存多餘(yu) 熱量；棕色脂肪負責分解引發肥胖的白色脂肪，將後者轉化成二氧化碳、水和熱量，本身不儲(chu) 存熱量。棕色脂肪組織呈棕色，其特點是組織中有豐(feng) 富的毛細血管，脂肪細胞內(nei) 散著許多小脂滴，線粒體(ti) 大而豐(feng) 富，核圓形，位於(yu) 細胞，這種脂肪細胞也稱為(wei) 多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少，新生兒(er) 及冬眠動物較多，在新生兒(er) 主要分布在肩胛間區、腋窩及頸後部等處。棕色脂肪組織僅(jin) 在嬰兒(er) 時期發揮作用，它們(men) 堆積在新生兒(er) 肩胛處，幫助維持體(ti) 溫。隨著年齡增長，棕色脂肪會(hui) 逐漸消失。終，動物體(ti) 內(nei) 隻殘存少量棕色脂肪細胞，分布於(yu) 頸部和鎖骨。脂肪幹細胞（ADSCs）是一種具有多向分化潛能的幹細胞，主要恢複組織細胞的修複功能，促進細胞的再生，恢複年輕麵容的同時，身體(ti) 機能也得到充分改善，有效改善亞(ya) 健康、早衰等疾病，由內(nei) 而外真正的有效抵抗衰老。脂肪幹細胞具有很多優(you) 點：①具有自我更新及多向分化的潛能；②來源充足；③對供區的創傷(shang) 較小；④獲得率及體(ti) 外擴增速率高。脂肪幹細胞是目前被廣泛應用於(yu) 組織工程領域中理想的種子細胞。
5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠棕色脂肪幹細胞采用膠原酶消化法製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的大鼠棕色脂肪幹細胞經CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
大鼠棕色脂肪幹細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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