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產(chan) 品名稱：兔晶狀體(ti) 上皮細胞
貨號：GOY-01X0695
規格：5×10⁵Cells/T25培養(yang) 瓶
分類：原代細胞
2.組織來源：晶狀體(ti) 組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：兔晶狀體(ti) 上皮細胞分離自晶狀體(ti) 組織；晶狀體(ti) 源自胚胎發育外胚層，僅(jin) 含有上皮細胞及其產(chan) 物，晶狀體(ti) 囊膜作為(wei) 屏障將晶狀體(ti) 與(yu) 其它類型細胞分開；因而，晶狀體(ti) 上皮細胞培養(yang) 既無神經和血管組織的幹擾，又不受其它類型細胞如成纖維細胞的汙染，保證了培養(yang) 中細胞成分的單一性。晶狀體(ti) 上皮細胞主要負責調節晶狀體(ti) 的生理平衡，包括電解質和液體(ti) 的輸送。在正常的發育過程中，晶狀體(ti) 上皮細胞分化和成熟，然後遷移到晶狀體(ti) 內(nei) 部，產(chan) 生晶體(ti) 蛋白，自身也拉長而變成晶狀體(ti) 纖維細胞，並終失去細胞核和其它的細胞器。研究表明，晶狀體(ti) 上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體(ti) 中的生長因子的調控，包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁後為(wei) 扁平不規則多角形，呈單層生長、連成膜狀。晶狀體(ti) 上皮細胞是緊密貼附於(yu) 晶狀體(ti) 前囊內(nei) 表麵的單層上皮細胞，其異常增殖和分化與(yu) 白內(nei) 障和後囊混濁的發生密切相關(guan) ，體(ti) 外培養(yang) 是研究其生長規律的主要手段。
5.方法簡介：公司實驗室分離的兔晶狀體(ti) 上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，並通過上皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的兔晶狀體(ti) 上皮細胞經BFSP2（晶狀體(ti) 蛋白）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息：包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 上皮細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 2-3代 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
兔晶狀體(ti) 上皮細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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