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NADH氧化酶(NOX)測試盒關鍵注意事項

發布時間:2025-09-23      點擊次數:0

使用NADH氧化酶(NOX)測試盒時,需特別注意反應體(ti) 係的穩定性。下是NADH氧化酶(NOX)測試盒使用時的關(guan) 鍵注意事項,綜合了不同檢測方法的通用要點:

一、樣本處理與(yu) 保存

‌樣本類型‌

組織樣本需按1:5-10比例(g/mL)加入提取液,冰浴勻漿後4℃ 16,000 g離心20分鍾取上清‌

細胞/細菌樣本建議500萬(wan) 細胞/mL提取液,冰浴超聲破碎(300 W,3秒間隔7秒,總3分鍾)後離心‌

血清樣本室溫靜置2小時或4℃過夜後離心,避免反複凍融‌

‌保存條件‌

上清液需立即檢測或-80℃保存,避免反複凍融導致酶活性下降‌

二、試劑與(yu) 儀(yi) 器準備

‌試劑平衡‌

試劑盒使用前需室溫平衡20分鍾,濃縮洗滌液結晶需水浴溶解‌

檢測溶液A/B需現配現用,避免長時間放置失效‌

‌儀(yi) 器校準‌

移液器需定期校準(推薦0.5-10μL、20-200μL多規格)‌

酶標儀(yi) 波長設置需匹配檢測方法(如比色法540-550nm)‌

三、操作關(guan) 鍵點

‌反應條件‌

37℃孵育時間需嚴(yan) 格按說明書(shu) (如20分鍾),溫度波動需<±0.5℃‌

顯色反應需避光(如Griess試劑法),5-20分鍾內(nei) 完成讀數‌

‌幹擾控製‌

避免使用含EDTA的樣本緩衝(chong) 液,可能抑製酶活性‌

標準品需梯度稀釋,S0孔作為(wei) 空白對照‌

四、數據解讀

‌結果計算‌

樣本稀釋倍數需在最終結果中乘回(如說明書(shu) 稀釋5倍則結果×5)‌

超出線性範圍需稀釋後複測‌

‌質控要求‌

每批次實驗需包含陽性/陰性對照‌

顯色後60分鍾內(nei) 完成檢測,避免顏色衰減‌


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