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谘詢電話:18321818584使用NADH氧化酶(NOX)測試盒時,需特別注意反應體(ti) 係的穩定性。下是NADH氧化酶(NOX)測試盒使用時的關(guan) 鍵注意事項,綜合了不同檢測方法的通用要點:
一、樣本處理與(yu) 保存
樣本類型
組織樣本需按1:5-10比例(g/mL)加入提取液,冰浴勻漿後4℃ 16,000 g離心20分鍾取上清
細胞/細菌樣本建議500萬(wan) 細胞/mL提取液,冰浴超聲破碎(300 W,3秒間隔7秒,總3分鍾)後離心
血清樣本室溫靜置2小時或4℃過夜後離心,避免反複凍融
保存條件
上清液需立即檢測或-80℃保存,避免反複凍融導致酶活性下降
二、試劑與(yu) 儀(yi) 器準備
試劑平衡
試劑盒使用前需室溫平衡20分鍾,濃縮洗滌液結晶需水浴溶解
檢測溶液A/B需現配現用,避免長時間放置失效
儀(yi) 器校準
移液器需定期校準(推薦0.5-10μL、20-200μL多規格)
酶標儀(yi) 波長設置需匹配檢測方法(如比色法540-550nm)
三、操作關(guan) 鍵點
反應條件
37℃孵育時間需嚴(yan) 格按說明書(shu) (如20分鍾),溫度波動需<±0.5℃
顯色反應需避光(如Griess試劑法),5-20分鍾內(nei) 完成讀數
幹擾控製
避免使用含EDTA的樣本緩衝(chong) 液,可能抑製酶活性
標準品需梯度稀釋,S0孔作為(wei) 空白對照
四、數據解讀
結果計算
樣本稀釋倍數需在最終結果中乘回(如說明書(shu) 稀釋5倍則結果×5)
超出線性範圍需稀釋後複測
質控要求
每批次實驗需包含陽性/陰性對照
顯色後60分鍾內(nei) 完成檢測,避免顏色衰減
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