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人的心房肌細胞

簡要描述:人的心房肌細胞在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,並可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:
  • 更新時間:2023-10-24 00:00:00
  • 訪  問  量:701

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詳細介紹

 公司細胞現貨供應,人的心房肌細胞質量有保證、*、實驗效果好,我司為(wei) 您提供免費代測服務,同時提供價(jia) 格、說明書(shu) 、規格、用途、實驗原理等相關(guan) 操作說明。
實驗要點及說明:
.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃製造,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-0分鍾並自然晾幹。
 運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與(yu) 客戶協商後選擇下述方式中的一種進行。
)mL凍存細胞懸液裝於(yu) .8ml的凍存管中,置於(yu) 裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養(yang) ,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存個(ge) 月。
2)T-25培養(yang) 瓶充滿*培養(yang) 基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳(chuan) 代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yang) 瓶至於(yu) 培養(yang) 箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養(yang) 基及培養(yang) 凍存條件準備:
)準備RPMI-640培養(yang) 基(RPMI-640:GIBCO,貨號2875-09),90%;優(you) 質胎牛血清,0%。
2)培養(yang) 條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yang) 箱濕度為(wei) 70%-80%。
3)凍存液:90%血清,0%DMSO,現用現配,液氮儲(chu) 存。

細胞凍存:
對培養(yang) 的細胞進行凍存的方法是將細胞置於(yu) 含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養(yang) 基中於(yu) 液氮中儲(chu) 存。冷凍保護劑可降低培養(yang) 基的冰點,並可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險  (冰晶可損傷(shang) 細胞,導致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與(yu) 此類物質安全危害相適應的設備和操作規範,並應按照當地法規處置此類試劑。 
細胞凍存指導原則
凍存細胞係以備將來之用時,必須遵守以下原則。與(yu) 其他細胞培養(yang) 操作一樣,我們(men) 建議您嚴(yan) 格遵守您所用細胞係附帶的操作說明,以便獲得結果。 
)在高細胞濃度情況下進行培養(yang) 細胞的凍存,並且細胞傳(chuan) 代次數盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為(wei) 90%。請注意凍存條件取決(jue) 於(yu) 所用細胞係。 
2)細胞應緩慢冷凍,可使用可控製降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鍾大約降低°C。
3)必須使用的凍存培養(yang) 基。凍存培養(yang) 基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞於(yu) -70°C 以下溫度儲(chu) 存;溫度高於(yu) -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質。 
5)必須使用無菌凍存管儲(chu) 存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸於(yu) 液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nei) 保存 
6)必須穿戴個(ge) 人防護設備。 
7)所有與(yu) 細胞接觸的溶液和設備均應為(wei) 無菌狀態。必須采用正確的無菌技術,並且在層流通風櫥內(nei) 進行。
實驗報告:
一分離與(yu) 培養(yang) :
    、無菌條件下,取出-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成mm3左右大小;
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.% *和0.% I型膠原酶),混懸0s,置37℃條件下消化0min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含0% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸0s,置37℃消化0 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
    4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,200r/min 離心0min,棄去上清,沉澱細胞用含有0% FBS DMEM/F2培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
    5、差速貼壁h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
    、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次0min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞5min;
    2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次0min,然後在4℃條件下,用0.%Triton X-00透膜5min;
    3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次0min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
    4、按: 00的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
    5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次0min,按:50的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置h;
    6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次0min,倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
 

 細胞還原型* GSH 濃度比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 植物* GLUTATHIONE 總濃度比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 體(ti) 液* GLUTATHIONE 總濃度比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 組織* GLUTATHIONE 總濃度比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 血液* GLUTATHIONE 總濃度比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 細胞* GLUTATHIONE 總濃度比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 植物過氧化氫酶 CATALASE 催化活性比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 細菌過氧化氫酶 CATALASE 催化活性比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 組織過氧化氫酶 CATALASE 催化活性比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 血液過氧化氫酶 CATALASE 催化活性比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 細胞過氧化氫酶 CATALASE 催化活性比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
細胞ATP酶活性堿性法染色試劑盒 免疫測定
  組織超氧化物陰離子比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 細胞超氧化物陰離子比色法定量檢測試劑盒 免疫測定
 植物氧化應激活性氧 ROS 光澤精化學發光法定量檢測試劑盒 免疫測定
 動物組織氧化應激活性氧 ROS 光澤精化學發光法定量檢測試劑盒 免疫測定
 真菌/酵母細胞內(nei) 氧化應激活性氧 ROS 光澤精化學發光法定量檢測試劑盒 免疫測定
組分氧化應激活性氧 ROS 光澤精化學發光法定量檢測試劑盒 免疫測定
細胞氧化應激活性氧 ROS 光澤精化學發光法定量檢測試劑盒 免疫測定
 細胞培養(yang) 懸液氧化應激活性氧 ROS 光澤精化學發光法定量檢測試劑盒 免疫測定
 動物細胞氧化應激活性氧 ROS 光澤精化學發光法定量檢測試劑盒 免疫測定
 體(ti) 液氧化應激活性氧 ROS 魯米諾化學發光法定量檢測試劑盒 免疫測定
 血液氧化應激活性氧 ROS 魯米諾化學發光法定量檢測試劑盒 免疫測定
 細胞樣品*氧化酶活性染色試劑盒 免疫測定
 冰凍切片乙酰*脂酶活性染色試劑盒 免疫測定
 細胞乙酰*脂酶活性染色試劑盒 免疫測定
 全組織蔗糖酶活性染色試劑盒 免疫測定
 冰凍切片蔗糖酶活性染色試劑盒 免疫測定
 細胞蔗糖酶活性染色試劑盒 免疫測定
 特殊石蠟切片磷脂尼羅紅 NileRed 間接熒光染色試劑盒 免疫測定
 冰凍切片甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 染色試劑盒 免疫測定
 特殊石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 直接染色試劑盒 免疫測定
 特殊石蠟切片甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 間接染色試劑盒 免疫測定
 細胞甘油三脂脂酶法格莫瑞 Gomori 染色試劑盒 免疫測定
 冰凍切片總* 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑盒 免疫測定
 特殊石蠟切片總* 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光直接染色試劑盒 免疫測定
 特殊石蠟切片總* 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光間接染色試劑盒 免疫測定
 細胞總* 酯酶法 菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑盒 免疫測定
 冰凍切片總遊離*菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑盒 免疫測定
 特殊石蠟切片總遊離*菲律賓 FILIPIN 熒光直接染色試劑盒 免疫測定
 特殊石蠟切片總遊離*菲律賓 FILIPIN 熒光間接染色試劑盒 免疫測定
 細胞總遊離*菲律賓 FILIPIN 熒光染色試劑盒 免疫測定
 細胞遊離*毛地黃皂苷法 DIGITONIN 舒爾茨染色試劑盒 免疫測定
 冰凍切片總*舒爾茨染色試劑盒 免疫測定
 細胞遊離*毛地黃皂苷法 DIGITONIN 高氯酸萘醌 PAN 染色試劑盒 免疫測定
 冰凍切片總*高氯酸萘醌 PAN 染色試劑盒 免疫測定
 人的心房肌細胞特殊石蠟切片總*高氯酸萘醌 PAN 間接染色試劑盒 免疫測定
 細胞總*高氯酸萘醌 PAN 染色試劑盒 免疫測定
 冰凍切片中性脂質油紅O染色試劑盒 免疫測定
 特殊石蠟切片中性脂質油紅O間接染色試劑盒 免疫測定

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