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產(chan) 品名稱：小鼠三叉神經元細胞
貨號：GOY-01X1414
分類：原代細胞
2.組織來源：三叉神經組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：小鼠三叉神經元細胞分離自三叉神經組織；三叉神經為(wei) 粗大的混合性腦神經，含一般軀體(ti) 感覺和特殊內(nei) 髒運動兩(liang) 種纖維。其特殊內(nei) 髒運動纖維起於(yu) 腦橋中段的三叉神經運動核，纖維組成三叉神經運動根，由腦橋基底部與(yu) 腦橋臂交界處出腦，位於(yu) 感覺根下內(nei) 側(ce) ，後進入三叉神經第3支下頜神經中，經卵圓孔出顱，隨下頜神經分支分布於(yu) 咀嚼肌等。運動根內(nei) 還含有三叉神經中腦核有關(guan) 的纖維，主要傳(chuan) 導咀嚼肌的本體(ti) 感覺。三叉神經內(nei) 以軀體(ti) 感覺神經纖維為(wei) 主，這些纖維的細胞體(ti) 位於(yu) 三叉神經節（半月節）內(nei) ，該神經節位於(yu) 顱中窩顴骨岩部的前麵三叉神經壓跡處，為(wei) 硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉神經節由假單極神經元組成，其中樞突集中構成了粗大的三叉神經感覺根，由腦橋基底部與(yu) 腦橋臂交界處入腦，止於(yu) 三叉神經諸感覺核，其中傳(chuan) 導痛溫覺的纖維主要終止於(yu) 三叉神經脊束核；傳(chuan) 導觸覺的纖維主要終止於(yu) 三叉神經腦橋核。三叉神經節細胞的周圍突組成三叉神經三大分支，即第1支眼神經、第2支上頜神經、第3支為(wei) 下頜神經。從(cong) 3大分支不斷分支分布於(yu) 麵部皮膚、眼及眶內(nei) 、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等，傳(chuan) 導痛、溫、觸等多種感覺。
5.方法簡介：公司實驗室分離的小鼠三叉神經元細胞采用消化法結合神經元專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 、化學試劑抑製法篩選製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的小鼠三叉神經元細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml） 培養(yang) 基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 神經元細胞樣 傳(chuan) 代特性 屬於(yu) 終末分化細胞；屬於(yu) 不增殖細胞群 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
小鼠三叉神經元細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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