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產(chan) 品分類
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產(chan) 品名稱：小鼠腸係膜平滑肌細胞
貨號：GOY-01X1402
分類：原代細胞
2.組織來源：腸係膜組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：小鼠腸係膜平滑肌細胞分離自腸係膜動脈組織；腸道指的是從(cong) 胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chan) 物的吸收都是在小腸內(nei) 進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經門排出體(ti) 外。腸道堪稱身體(ti) 勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yang) 分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體(ti) 內(nei) 的微生態係統。腸係膜動脈由背大動脈發出的走行在腸係膜內(nei) ，分布於(yu) 消化管的動脈。分成腸係膜上動脈和腸係膜下動脈。前者主要分布於(yu) 小腸左側(ce) ，後者分布於(yu) 結腸、大腸、泄殖腔等處。腸動脈平滑肌細胞原代分離培養(yang) 3天後，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周後細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐(feng) 富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為(wei) 旋渦狀或柵欄狀。傳(chuan) 代後細胞生長較快，4-6天即可匯合，並保持上述形態學特征和生長特點。
5.方法簡介：公司實驗室分離的小鼠腸係膜平滑肌細胞采用-膠原酶聯合消化法製備而來製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的小鼠腸係膜平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 2-3代左右 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
小鼠腸係膜平滑肌細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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