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產(chan) 品名稱：大鼠外周血淋巴細胞
貨號：GOY-01X1401
分類：原代細胞
2.組織來源：血液組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：大鼠外周血淋巴細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨(lin) 床上常用一些方法把骨髓中的造血幹細胞釋放到血液中，再在從(cong) 血液中提取分離得到造血幹細胞，我們(men) 把這樣得到的幹細胞稱為(wei) 外周血幹細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。淋巴細胞（lymphocyte）是白細胞的一種，是體(ti) 積小的白細胞。其由淋巴器官產(chan) 生，主要存在於(yu) 淋巴管中循環的淋巴液中，是機體(ti) 免疫應答功能的重要細胞成分，是淋巴係統幾乎全部免疫功能的主要執行者，是對抗外界感染和監控體(ti) 內(nei) 細胞變異的一線“士兵”。淋巴細胞是一類具有免疫識別功能的細胞係，按其發生遷移、表麵分子和功能的不同，可分為(wei) T淋巴細胞（又名T細胞）、B淋巴細胞（又名B細胞）和自然殺傷(shang) （NK）細胞。T細胞和B細胞都是抗原特異性淋巴細胞，它們(men) 的初來源是相同的，都來自造血組織。T淋巴細胞隨血循環到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B細胞在骨髓中分化成熟。當受抗原刺激後，T淋巴細胞即轉化為(wei) 淋巴母細胞，再分化為(wei) 致敏T淋巴細胞，參與(yu) 細胞免疫，其免疫功能主要是抗胞內(nei) 感染、瘤細胞與(yu) 異體(ti) 細胞等；而B淋巴細胞是先轉化為(wei) 漿母細胞，再分化為(wei) 漿細胞，產(chan) 生並分泌免疫球蛋白（抗體(ti) ），參與(yu) 體(ti) 液免疫，其功能是產(chan) 生抗體(ti) ，提呈抗原，以及分泌細胞內(nei) 因子參與(yu) 免疫調節；NK細胞不依賴抗原刺激而自發地發揮細胞毒效應，具有殺傷(shang) 靶細胞的作用。
5.方法簡介：公司實驗室分離的大鼠外周血淋巴細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法製備而來製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的大鼠外周血淋巴細胞經過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 懸浮 細胞形態 圓形 傳(chuan) 代特性 不增殖；不傳(chuan) 代 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
大鼠外周血淋巴細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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