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產(chan) 品名稱:大鼠滑膜間充質幹細胞
貨號:GOY-01X1390
分類:原代細胞
2.組織來源:滑膜組織
3.產(chan) 品規格:5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介:大鼠滑膜間充質幹細胞分離自滑膜組織;滑膜組織是位於(yu) 關(guan) 節腔內(nei) 麵的內(nei) 襯結構,各種關(guan) 節內(nei) 疾病均會(hui) 累及滑膜。而滑膜細胞是維持關(guan) 節正常功能的重要組織結構,同時在各種關(guan) 節疾患中也是主要病變部位。骨關(guan) 節炎(OA)以關(guan) 節軟骨退行性變為(wei) 特征,其病理改變累及關(guan) 節的各個(ge) 組成部分,但絕不僅(jin) 局限於(yu) 軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關(guan) 節的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的細胞群體(ti) ,是維持關(guan) 節正常功能的重要組織結構,它包埋在顆粒狀無定性的基質中,基質內(nei) 有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成。滑膜細胞主要功能:①滑膜細胞產(chan) 生潤滑液成分,並且與(yu) 關(guan) 節腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guan) ;②滑膜細胞增生,表現為(wei) 不依賴於(yu) 支持物生長,並且分泌大量的效應分子來促進炎症和關(guan) 節損壞;③是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分。
5.方法簡介:公司實驗室分離的大鼠滑膜間充質幹細胞采用膠原酶消化法和低密度接種法製備而來,細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測:公司實驗室分離的大鼠滑膜間充質幹細胞經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息: 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 5代左右;3代以內(nei) 狀態 培養(yang) 條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
培養(yang) 操作:

大鼠滑膜間充質幹細胞1)複蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yang) 基,培養(yang) 過夜)。第二天換液並 檢查細胞密度。
2)細胞傳(chuan) 代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基,輕輕打勻後吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yang) 基後,PBS 清洗一遍後加入 1ml ,細胞變圓 脫 落後,加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為(wei) 10%,細胞密度不低於(yu) 1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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