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產(chan) 品分類
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產(chan) 品名稱：人前列腺基質細胞
貨號：GOY-01X1383
分類：原代細胞
2.組織來源：前列腺
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：人前列腺基質細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性特有的性腺器官；前列腺是不成對的實質性器宮，由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子，底朝上，與(yu) 膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前麵貼恥骨聯合，後麵依直腸。前列腺腺體(ti) 的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體(ti) 非常少有的，具有內(nei) 、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為(wei) 外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構成精液主要成分；作為(wei) 內(nei) 分泌腺，前列腺分泌的激素稱為(wei) “前列腺素”。常見疾病為(wei) 良性前列腺增生，在病理學上良性前列腺增生症又稱前列腺結節狀增生，是前列腺中常見的產(chan) 生症狀的瘤樣病變，結節開始發生可能是基質細胞自發逆轉至胚胎階段，其生長潛力可能是基質-上皮之間的相互協同作用所致，終形成前列腺增生。基質細胞是器官中結締組織細胞，起到為(wei) 器官中實質細胞提供支持和營養(yang) 的作用，成纖維細胞、炎症細胞、免疫細胞以及周皮細胞都是常見的基質細胞類型。基質細胞和腫瘤細胞的相互作用在腫瘤細胞的生長過程中具有重要作用。體(ti) 外培養(yang) 人前列腺基質細胞對治療前列腺增生有重要的研究意義(yi) 。
5.方法簡介：公司實驗室分離的人前列腺基質細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的人前列腺基質細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息：包被條件 貼壁不包被 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 成纖維細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
人前列腺基質細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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