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產(chan) 品名稱：小鼠三叉神經星形膠質細胞
貨號：GOY-01X1382
分類：原代細胞
2.組織來源：腦組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：小鼠三叉神經星形膠質細胞分離自三叉神經組織；三叉神經為(wei) 粗大的混合性腦神經，含一般軀體(ti) 感覺和特殊內(nei) 髒運動兩(liang) 種纖維。其特殊內(nei) 髒運動纖維起於(yu) 腦橋中段的三叉神經運動核，纖維組成三叉神經運動根，由腦橋基底部與(yu) 腦橋臂交界處出腦，位於(yu) 感覺根下內(nei) 側(ce) ，後進入三叉神經第3支下頜神經中，經卵圓孔出顱，隨下頜神經分支分布於(yu) 咀嚼肌等。運動根內(nei) 還含有三叉神經中腦核有關(guan) 的纖維，主要傳(chuan) 導咀嚼肌的本體(ti) 感覺。三叉神經內(nei) 以軀體(ti) 感覺神經纖維為(wei) 主，這些纖維的細胞體(ti) 位於(yu) 三叉神經節（半月節）內(nei) ，該神經節位於(yu) 顱中窩顴骨岩部的前麵三叉神經壓跡處，為(wei) 硬腦膜形成的美克爾腔包裹。神經膠質細胞是神經組織中除神經元以外的另一大類細胞，也有突起，但無樹突和軸突之分，廣泛分布於(yu) 中樞和周圍神經係統。在哺乳類動物中，神經膠質細胞與(yu) 神經元的細胞數量比例約為(wei) 10：1。在中樞神經係統（CNS）中的神經膠質細胞主要有星形膠質細胞、少突膠質細胞（與(yu) 前者合稱為(wei) 大膠質細胞）和小膠質細胞等。傳(chuan) 統認為(wei) 膠質細胞屬於(yu) 結締組織，其作用僅(jin) 是連接和支持各種神經成分，其實神經膠質還起著分配營養(yang) 物質、參與(yu) 修複和吞噬的作用，在形態、化學特征和胚胎起源上都不同於(yu) 普通結締組織。星形膠質前體(ti) 細胞主要表達Vimentin，而成熟之後表達Vimentin和膠質纖維酸性蛋白（GFAP），故GFAP被認為(wei) 是星形膠質細胞成熟的標誌物。
5.方法簡介：公司實驗室分離的小鼠三叉神經星形膠質細胞采用消化法結合差速貼壁法篩選製備而來，細胞總量約為(wei) 5×105cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的小鼠三叉神經星形膠質細胞經GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息： 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 梭形、多角形 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 2-3代左右 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
小鼠三叉神經星形膠質細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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