歡迎來到hth体育网址網站！
谘詢電話：18321818584歡迎來到hth体育网址網站！谘詢電話：18321818584
產(chan) 品分類
Product Category相關(guan) 文章
Related Articles詳細介紹
產(chan) 品名稱：兔角膜內(nei) 皮細胞
貨號：GOY-01X0677
規格：5×10⁵Cells/T25培養(yang) 瓶
分類：原代細胞
2.組織來源：眼角膜組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：兔角膜內(nei) 皮細胞分離自眼角膜組織；角膜位於(yu) 眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從(cong) 後麵看角膜呈正圓形，從(cong) 前麵看為(wei) 橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，。角膜有十分敏感的神經末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(hui) 不由自主地合上以保護眼睛。為(wei) 了保持透明，角膜並沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yang) 份及氧氣。角膜分為(wei) 五層，由前向後依次為(wei) ：上皮細胞層、前彈力層、基質層、後彈力層、內(nei) 皮細胞層。角膜的高度透明性和光學性是正常發揮生理功能的必要條件之一，而角膜內(nei) 皮細胞（CEC）在維持角膜的正常生理功能方麵起重要作用。角膜內(nei) 皮細胞是角膜內(nei) 層的單層細胞，構成了後彈力層和房水之間的物理屏障，通過離子“泵”功能調節角膜中離子濃度和水分，維持角膜的半脫水狀態，保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內(nei) 皮細胞功能出現紊亂(luan) ，常導致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nei) 皮細胞主要功能有：①角膜是的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能；②角膜內(nei) 皮細胞對角膜透明性有重要作用；③角膜內(nei) 皮細胞通過Na+-K+-ATP酶活性，維持角膜和房水內(nei) Na+梯度，防止水分滲入角膜內(nei) ，維持角膜實質層相對脫水狀態，維持透明性。
5.方法簡介：公司實驗室分離的兔角膜內(nei) 皮細胞采用混合膠原酶消化結合內(nei) 皮細胞專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10?cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的兔角膜內(nei) 皮細胞經NSE（神經元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 內(nei) 皮細胞樣 傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 2-3代 培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
兔角膜內(nei) 皮細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
產(chan) 品谘詢
電話
微信掃一掃
聯係人：銷售部
地址：上海市嘉定區澄瀏公路52號盛創企業
郵箱：3004918891@qq.com
手機：18321818584 / 15026555973