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產(chan) 品名稱：雞卵泡顆粒細胞
貨號：GOY-01X0672
規格：5×10⁵Cells/T25培養(yang) 瓶
分類：原代細胞
2.組織來源：雞卵泡組織
3.產(chan) 品規格：5×105cells/T25細胞培養(yang) 瓶
4.細胞簡介：雞卵泡顆粒細胞分離自雞卵泡組織；成熟卵泡是卵巢的組織結構成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明顯。卵泡內(nei) 膜細胞緊靠卵泡顆粒層，與(yu) 顆粒層細胞之間有一層基膜相隔，內(nei) 膜細胞呈多邊形，胞質清亮，胞核圓形，細胞間可見許多毛細血管，外膜細胞位於(yu) 最外層，多呈梭形，與(yu) 周圍結締組織分界不明顯。卵泡（follicle）中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞，在卵泡開始發育、卵細胞成長的同時，周圍的菱形細胞變為(wei) 立方形，並由單層增生成複層，因其細胞漿內(nei) 含有顆粒，故稱為(wei) 顆粒細胞。初級卵泡的顆粒細胞為(wei) 單層；次級卵泡的顆粒細胞增至複層；成熟卵泡的顆粒細胞展開又變為(wei) 單層。顆粒細胞的胞核大而圓，著色深，細胞的遊離麵有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部。
5.方法簡介：公司實驗室分離的雞卵泡顆粒細胞采用先機械分離後膠原酶聯合消化法、並通過專(zhuan) 用培養(yang) 基培養(yang) 篩選製備而來，細胞總量約為(wei) 5×10cells/瓶。
6.質量檢測：公司實驗室分離的雞卵泡顆粒細胞經FSHR免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體(ti) 、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yang) 信息：培養(yang) 基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等換液頻率 每2-3天換液一次生長特性 貼壁細胞形態 上皮細胞樣傳(chuan) 代特性 可傳(chuan) 1代消化液 0.25%培養(yang) 條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
培養(yang) 操作：
雞卵泡顆粒細胞1）複蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yang) 基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鍾，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培 養(yang) 過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yang) 基，培養(yang) 過夜）。第二天換液並 檢查細胞密度。
2）細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培 養(yang) 箱中消化 1-2 分鍾，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加少量培養(yang) 基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yang) 基，輕輕打勻後吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鍾，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yang) 液後吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yang) 基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下麵 T25 瓶為(wei) 類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yang) 基後，PBS 清洗一遍後加入 1ml ，細胞變圓 脫 落後，加入 1ml 含血清的培養(yang) 基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為(wei) 10%，細胞密度不低於(yu) 1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置於(yu) 程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(ge) 小時以後轉入液氮灌儲(chu) 存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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