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山羊催乳素(PRL)elisa檢測試劑盒​操作流程描敘

發布時間:2022-11-15      點擊次數:562

操作流程描敘


         、將要進行實驗的版孔進行設定好,標準品 5 個(ge) 點,每個(ge) 點設定平行,需要用到 0 個(ge) 孔,空白隻需 個(ge) 孔。剩下孔可以做為(wei) 樣本孔


         2、 稀釋標準,準備好 5 個(ge) EP 管,然後在每個(ge) EP 管中加入 50 微升標準稀釋液,編上編碼,分別為(wei) ,2,3,4,5,在 號管中加入 50 標準品,用槍頭反複吹打 0 次左右(注意控製幅度不要過大容易產(chan) 生氣泡)如果有渦旋儀(yi) 可以在渦旋儀(yi) 上渦旋 5 秒左右,然後換槍頭,在 號管中取 50 微升加入到 2 號管,後麵過程一次類推。最後稀釋完,前麵 4 個(ge) 管中每管液體(ti) 在 50 微升,5 號管為(wei) 300 微升。濃度是從(cong) 大到小。


         3、 標準、樣本、空白加樣:標準是每個(ge) 濃度點 2 個(ge) 孔(做平行),每孔加入 50 微升,加樣過程中注意換槍頭,樣本孔中每孔加入 50 微升,加樣過程中注意換槍頭,空白孔加入 50 微升標準稀釋液或者樣本稀釋液。特別要說明的是,標準加樣和樣本加樣盡量控製在 5 分鍾內(nei) 加完,如果時間拖的太長,會(hui) 導致前麵孔先反應後麵孔才開始反應,這樣數值偏差過大。加完樣後蓋上封板膜,至 37 攝氏度孵育 30 分鍾.


        4、洗版,在孵育過程中可以將洗滌液配好,20 ml30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水或者去離子水定容到 600 ml 即可。每孔加入 250-300 微升的洗滌液(不要漫過版孔),(如果有震蕩儀(yi) 的話,可以講板子放入震蕩儀(yi) 上 5 秒左右,然後靜止三十秒,沒有請忽略次過程)將板子在桌子上晃動 5 秒左右,然後靜置 30 秒,甩幹,拍板。說明:甩幹過程盡量要快, 秒內(nei) 就可以完成,不要慢慢傾(qing) 斜倒掉液體(ti) ,直接翻板甩掉液體(ti) 即可。拍板過程需要在桌子上墊一層吸水紙或者濾紙,版孔朝下拍幾下,拍幹區別主要看吸水紙和濾紙上沒有明顯的水漬為(wei) 完成。


         5、每孔加入 50 微升的酶標試劑,此處在空白孔中不需要加(空白孔為(wei) 空),孵育 30 分鍾。


         6、  洗版同步驟 4


         7、顯色,先每孔中加入 50 微升的顯色 A 液,然後每孔中加入 50  微升顯色  B  液。避光 37 攝氏度顯色 5 分鍾


         8、終止,每孔加入 50 微升的終止液,注意,加完終止液必須在 5  分鍾內(nei) 讀數,超過時間讀數無效。在規定時間內(nei) 讀數都是有效的。


         9、至此,整個(ge) 實驗結束。


需要額外提醒的是:


       在做完整個(ge) 實驗過儀(yi) 器之前,儀(yi) 器最好預熱半小時,這個(ge) 計算好時間,也可以直接將儀(yi) 器一直開著,直到整個(ge) 實驗結束。


       在加液過程中不要使槍頭觸及到板子底部,一般槍頭都懸空,可以將槍頭靠在孔邊緣,但槍頭尖懸空,如果槍頭上殘留液體(ti) 看整體(ti) 多少量,不要吹打下去。特別忌諱在版孔內(nei) 壁流向版孔。整個(ge) 加液過程不要產(chan) 生氣泡。(洗滌液除外)


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