臨(lin) 床上多種病原生物如病毒、立克次體(ti) 、衣原體(ti) 、胞內(nei) 寄生的細菌、原蟲等的分離培養(yang) 基和藥物敏感試驗是通過細胞培養(yang) 技術完成的,如人免疫缺陷病毒(HIV)和新近出現的嚴(yan) 重急性呼吸綜合征(SARS)病毒等就是通過細胞培養(yang) 發現的。臨(lin) 床應用微量全血培養(yang) 技術診斷HIV的感染,已用於(yu) 兒(er) 童HIV垂直感染的早期診斷及可疑感染者的確認。
.病毒的分離的常用細胞
對病毒性疾病的病原學診斷,zui可靠的方法是從(cong) 標本中分離並鑒定出致病性病毒。由於(yu) 病毒具有嚴(yan) 格的細胞內(nei) 寄生性,對病毒的分離培養(yang) 必須選用敏感的細胞培養(yang) 基,包括動物、雞胚和細胞培養(yang) 。目前zui被廣泛采用的方法就是細胞培養(yang) 技術。用於(yu) 病毒分離的細胞種類很多,由於(yu) 不同種類病毒對細胞的敏感性不同,因此首先應根據病毒的種類選擇敏感細胞進行分離培養(yang) 。細胞的種類按其來源、染色體(ti) 特征及傳(chuan) 代次數等可分為(wei) 原代細胞、二倍體(ti) 細胞及傳(chuan) 代細胞3種類型。但由於(yu) 原代細胞隻能傳(chuan) ~3代,器官來源、操作繁鎖等問題使該方法應用受限,而二倍體(ti) 細胞和傳(chuan) 代細胞,由於(yu) 可以傳(chuan) 代、培養(yang) 方便,故較為(wei) 常用。
2.體(ti) 外抗病毒要效試驗
抗病毒要效測定試驗分為(wei) 體(ti) 內(nei) 試驗和體(ti) 外試驗。體(ti) 外試驗是采用組織細胞培養(yang) 基來觀察藥物的抗病毒作用。在實驗中要根據藥物的特性來選擇病毒;根據病毒對細胞易感性選擇所用細胞;觀察藥效指標常采用病毒致細胞病變(CPE)情況來判定藥物的抗病毒效果。下麵以抗呼吸道病毒要物為(wei) 例采用微量細胞培養(yang) 法介紹藥物體(ti) 外抑病毒試驗方法。
0vail
25克 Cholic acid 牛膽酸 BR,98%
00克
500克
0克 Hyodeoxycholic acid 培養(yang) 基 BR,98%
25克
00克
0克 Deoxycholic acid 去氧膽酸 BR,99%,有害品
00克
500克
0克 Dehydrocholic acid 脫氫膽酸 BR,98.5%
50克
500克
25克 Sodium dehydrocholate 脫氫膽酸鈉 BR,98%
5克 UDCS 烏(wu) 索去氧膽酸 BR,98%
25克
5克 CDCA 培養(yang) 基脫氧鵝膽酸 BR,98%
25克
00克
250克 Egg yolk powder 蛋黃粉 BR
500克 Agar 寒天 BR,強度200g/c㎡
25公斤
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