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產(chan) 品名稱 | 規格 | 貨號 |
HCC1937 (人乳腺癌細胞) | 1×10⁶/T25培養(yang) 瓶 | GOY-01X0092 |
商品詳情：
名稱；HCC1937 (乳腺癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱 HCC-1937
種屬 人類
年齡（性別） 女性，23歲
組織來源 乳房；原發性導管癌；3級，ⅡB期
生長特性 貼壁細胞
細胞形態 上皮細胞樣
背景描述 HCC1937細胞1995年10月13日初來源於(yu) 原發性導管癌，用了11.5個(ge) 月建株。腫瘤分類為(wei) TNMⅡB期，3級。BRCA1分析表明，HCC1937細胞是BRCA 15382C突變純合的，而來源於(yu) 同一病人的類淋巴母細胞細胞株在這個(ge) 突變位點上是雜合的。另兩(liang) 個(ge) 家庭成員也有這個(ge) 突變；一個(ge) 同卵雙生姐妹也患有乳腺癌。HCC1937細胞有一個(ge) 後天的Tp53突變，而其野生型等位基因丟(diu) 失；一個(ge) PTEN基因的後天的純合缺失，以及多個(ge) 與(yu) 乳腺癌發病機理相關(guan) 的位點上發生的雜合突變。HCC1937細胞Her2-neu和p53表達都呈陰性。HCC1937細胞的上皮細胞特異性標誌上皮細胞糖蛋2(EGP2)和細胞角蛋白19都呈陽性；雌激素受體(ti) (ER)和孕酮(PR)表達陰性。
生物安全等級 1
生長培養(yang) 基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳(chuan) 代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~50-60小時
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養(yang) 基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yang) 條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
受體(ti) 表達情況 estrogen receptor, negative; progesterone receptor, negative
基因表達情況 Epithelial glycoprotein 2 (EGP2); cytokeratin 19
細胞培養(yang) 步驟：
一、HCC1937 (人乳腺癌細胞)複蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yang) 基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鍾，棄去上清液，補加4-6mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yang) 過夜。第二天換液並檢查細胞密度。
二、細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
a）、 對於(yu) 貼壁細胞，傳(chuan) 代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2min，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加5ml以上含10%血清的培養(yang) 基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，脫落後吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yang) 液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yang) 液的新皿中或者瓶中。
b）、對於(yu) 懸浮細胞，傳(chuan) 代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鍾，棄上清液，補加1-2ml培養(yang) 液後吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄半數培養(yang) 基後，將剩餘(yu) 細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yang) 基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞後，用75%酒精噴灑整個(ge) 管子消毒後放到超淨台或安全櫃內(nei) ，嚴(yan) 格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yang) 瓶或6cm培養(yang) 皿，加入5ml左右培養(yang) 基混勻，放入培養(yang) 箱過夜培養(yang) 後查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養(yang) ，視情況傳(chuan) 代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳(chuan) 代（方法同上）。
三、細胞凍存：
1、細胞生長至覆蓋培養(yang) 瓶的80%麵積時，棄25cm2培養(yang) 瓶中的培養(yang) 液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yang) 瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後加入培養(yang) 液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然後將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，並放置於(yu) 凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置於(yu) -20℃ 1.5h，然後將其移入-80℃
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