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性能指標:點擊了解更多。
.鮑皰疹樣病毒PCR檢測試劑盒價(jia) 格 試劑盒檢測特異性為(wei) 00%
2. 檢測試劑盒重現性為(wei) 00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為(wei) 6個(ge) 月
產(chan) 品名稱:鮑皰疹樣病毒PCR檢測試劑盒價(jia) 格
英文名稱:Abalone Shriveling Syndromeassociated Virus(AbSV)PCR
規格:詳見說明書(shu)
類別:PCR檢測試劑盒
運輸:低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為(wei) 6 個(ge) 月。
自備試劑:樣品 RNA。

使用方法:
一、鮑皰疹樣病毒PCR檢測試劑盒價(jia) 格樣品 RNA 的製備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chan) 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA
. 按下表配製 RT 反應體(ti) 係(20 μL 體(ti) 係)
2. 70℃保溫 5 分鍾變性模板後立即冰浴。
3. 嚴(yan) 格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),
反應終體(ti) 積為(wei) 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鍾。此步為(wei) RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鍾以終止反應,然後放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為(wei) PCR 模板使用,丌需要純化。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guan) 鍵,PCR 產(chan) 物的特異性取決(jue) 於(yu) 引物與(yu) 模板DNA互補的程度。理論上,隻要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體(ti) 外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為(wei) 20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為(wei) 宜,特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為(wei) 宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個(ge) 以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nei) 部出現二級結構,避免兩(liang) 條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會(hui) 形成引物二聚體(ti) ,產(chan) 生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個(ge) 堿基,應嚴(yan) 格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與(yu) 核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chan) 生所需要的結果為(wei) 好,引物濃度偏高會(hui) 引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體(ti) 的機會(hui) 。
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注意事項:
①鮑皰疹樣病毒PCR檢測試劑盒價(jia) 格加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用幹淨的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書(shu) 中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露於(yu) 光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成後應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍幹,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉汙染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書(shu) 儲(chu) 存,使用前恢複到室溫。稀稀過後的標準品應丟(diu) 棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
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