二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒紫外分光光度法

簡要描述：二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒二磷酸核酮糖羧化酶（EC 4.1.1.39）是植物光合作用中的一個(ge) 關(guan) 鍵酶，既控製著CO2的固定，同時又製約著碳素向Calvin循環和光呼吸循環分流，其活性的大小直接影響著光合速率。

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二磷酸核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒紫外分光光度法

50 管/48 樣 25管/24樣

正式測定前務必取 2-3 個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定

測定意義(yi) ：

二磷酸核酮糖羧化酶（EC 4.1.1.39）是植物光合作用中的一個(ge) 關(guan) 鍵酶，既控製著CO2的固定，

同時又製約著碳素向Calvin循環和光呼吸循環分流，其活性的大小直接影響著光合速率。

測定原理：

（1）在 Rubisco 的催化下，1 分子的核酮糖-1，5-二磷酸（RuBP）與(yu) 1 分子的 CO2 結合，

產(chan) 生 2 分子的 3-磷酸甘油酸（PGA）；（2）PGA 可通過外加的 3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3- 磷酸脫氫酶的作用，產(chan) 生甘油醛-3-磷酸，伴隨著 NADH 氧化生成 NAD+；（3）在 340 nm NADH

有特征吸收峰，而 NAD+沒有此吸收峰，因此測定 340nm 吸光度下降速率可以代表 Rubisco

的羧化酶活性。

需自備的儀(yi) 器和用品：

可見-紫外分光光度計、台式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰

和蒸餾水。

試劑的組成和配製：

提取液一：液體(ti) 50mL×1 瓶，4℃保存。

提取液二：液體(ti) 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：60mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨(lin) 用前加入 25mL 試劑一，充分混勻待用；用不完的試劑

分裝後-20℃保存，禁止反複凍融；

試劑三：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨(lin) 用前加入 25mL 試劑一，充分混勻待用；用不完的試劑

分裝後-20℃保存，禁止反複凍融；

試劑四：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨(lin) 用前加入 2.5 mL 試劑一，充分溶解待用；用不完的試劑

分裝後-20℃保存，禁止反複凍融；

（注意：試劑二、三、四溶解後，按需分裝-20℃保存。）

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