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Ca++Mg++ ——ATP酶測試盒可見分光光度法
50 管/24 樣
正式測定前務必取 2-3 個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定
測定意義(yi) :
Ca++ Mg++-ATP 酶廣泛分布於(yu) 植物、動物、微生物和細胞中,可催化 ATP 水解生成 ADP 和無機磷。
測定原理:
根據 Ca++ Mg++-ATP 酶分解 ATP 生成 ADP 及無機磷,通過測定無機磷的量來確定 ATP 酶活性高低。
需自備的儀(yi) 器及用品:
可見分光光度計、水浴鍋、台式離心機、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸
餾水。
試劑的組成和配製:
提取液: 液體(ti) 50mL ×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體(ti) 10mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體(ti) 5mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體(ti) 5ml×1 瓶,4℃保存。
試劑四:粉劑×3 支,-20℃保存。用時每支加 1mL 蒸餾水,現用現配;用不完的試劑分裝
後-20℃保存,禁止反複凍融。
試劑五:液體(ti) 5mL×1 瓶,4℃保存。
試劑六:粉劑×1 瓶,4℃保存。用時加入 3mL 蒸餾水, 4℃保存。
試劑七:粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時加入 25mL 蒸餾水,溶解後 4℃保存一周。
試劑八:粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時加入 25mL 蒸餾水,溶解後 4℃保存一周。
試劑九:液體(ti) 25mL×1 瓶,室溫保存。
試劑十:10mmol/L 標準磷貯備液 10mL×1 瓶,4℃保存。
0.5μmol/mL 標準磷應用液配製:將試劑十 20 倍稀釋,即取 0.1mL 試劑十加 1.9mL 蒸餾水充分混勻。
定磷劑的配製:按 H2O: 試劑七:試劑八:試劑九=2:1:1:1 的比例配製,配好的定磷劑應為(wei) 淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍色則為(wei) 磷汙染,定磷劑現用現配。
注意:配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷汙染。

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