NADP蘋果酸酶(NADPME)測試盒紫外分光光度法
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
ME 廣泛存在於微生物、培養細胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME 催化蘋果酸氧化
脫羧的可逆反應,產生丙酮酸和 CO2,以及伴隨 NAD(P)+的還原反應,是蘋果酸代謝的關鍵酶。ME 活性與生
物合成和抗氧化密切相關。近年來植物 ME 活性測定較多,已經成為抗氧化研究的熱點。根據輔酶專一性和
對底物特異性的不同,可將 ME 分為 NAD-ME(EC1.1.1.38)和 NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測定原理:
NADP-ME 催化 NADP+還原成 NADPH,在 340nm 下測定 NADPH 增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、水浴鍋、台式離心機、可調式移液器、1 mL 石英比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配製:
提取液:60mL×1 瓶,4℃保存。;
試劑一:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存; 臨用前加入 50mL 試劑一充分振蕩,溶解待用,用不完的試劑分裝後-20
度保存,禁止反複凍融。
試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 6mL 蒸餾水充分振蕩,溶解待用,用不完的試劑分裝後-20 度
保存,禁止反複凍融。
