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TCCSUP (人膀胱癌細胞)

簡要描述:TCCSUP (人膀胱癌細胞)生長培養(yang) 基 MEM+10% FBS+1%P/S 凍存液:55% 基礎培養(yang) 基+40%FBS+5%DMSO

  • 產品型號:GOY-01X0614 
  • 廠商性質:科研
  • 更新時間:2023-10-24 00:00:00
  • 訪  問  量:249

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公司所有產(chan) 品僅(jin) 供科學實驗,不做其他科學實驗外的使用!

產(chan) 品名稱

規格

貨號

TCCSUP (人膀胱癌細胞)

1×10⁶/T25培養(yang) 瓶

GOY-01X0614

商品詳情:

名稱TCCSUP (膀胱癌細胞) (STR鑒定正確)

別稱 TCCSuP; TCC-SUP; TCC Sup

種屬 人類

年齡(性別) 女性,67歲

組織來源 膀胱

生長特性 貼壁細胞

細胞形態 上皮細胞樣

背景描述 The TCCSUP line was isolated in 1974 from an anaplastic transitional cell carcinoma (TCC) in the neck of the urinary bladder.

生物安全等級 1

生長培養(yang) 基 MEM+10% FBS+1%P/S

推薦傳(chuan) 代比例 1:2-1:3

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~28小時 (PubMed=3708594); 46小時 (PubMed=25984343); 49.2小時 (PubMed=26055179); ~30-40小時 (DSMZ).

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養(yang) 基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yang) 條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

抗原表達情況 HLA 2, 3, 7, 12

7.png
細胞培養(yang) 步驟:

一、TCCSUP (人膀胱癌細胞)複蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yang) 基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鍾,棄去上清液,補加4-6mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養(yang) 過夜。第二天換液並檢查細胞密度。

二、細胞傳(chuan) 代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。

a)、 對於(yu) 貼壁細胞,傳(chuan) 代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yang) 上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu) 培養(yang) 瓶中,置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2min,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養(yang) 瓶後加5ml以上含10%血清的培養(yang) 基終止消化。

3.輕輕吹打細胞,脫落後吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yang) 液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yang) 液的新皿中或者瓶中。

b)、對於(yu) 懸浮細胞,傳(chuan) 代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鍾,棄上清液,補加1-2ml培養(yang) 液後吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或瓶中。

方法二:可選擇半數換液方式,棄半數培養(yang) 基後,將剩餘(yu) 細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yang) 基新皿中或者瓶中。

PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞後,用75%酒精噴灑整個(ge) 管子消毒後放到超淨台或安全櫃內(nei) ,嚴(yan) 格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養(yang) 瓶或6cm培養(yang) 皿,加入5ml左右培養(yang) 基混勻,放入培養(yang) 箱過夜培養(yang) 後查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續培養(yang) ,視情況傳(chuan) 代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳(chuan) 代(方法同上)。

三、細胞凍存:

1、細胞生長至覆蓋培養(yang) 瓶的80%麵積時,棄25cm2培養(yang) 瓶中的培養(yang) 液,用PBS清洗細胞一次;

2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yang) 瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓後加入培養(yang) 液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然後將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

3、用適量的凍存液重懸細胞,並放置於(yu) 凍存管中;

4、先將細胞凍存管放置於(yu) -20℃ 1.5h,然後將其移入-80℃

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