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產(chan) 品名稱：高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白(Human，人)
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1
型號：GOY-01D03
| 物種 | Homo sapiens (Human，人) |
| 來源 | 原核表達 |
| 宿主E.coli內毒素水平 | <1.0EU/μg(LAL法測定) |
| 亞細胞定位 | 分泌, 細胞質 |
| 預測分子量 | 47.2kDa |
| 實際分子量 | 47kDa(差異分析請參閱說明書) |
| 片段與標簽 | Gly204~Leu364 with N-terminal His and GST Tag |
| 緩衝液成份 | 20mM Tris, 150mM NaCl緩衝液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） |
| 性狀 | 凍幹粉純度：> 90% |
| 等電點 | 6.6 |
| 應用 | Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
| 規格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
Ⅰ 實體(ti) 組織蛋白的提取
1．高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑製劑， 1 μL蛋白酶抑製劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鍾待用。
2． 每100mg固體(ti) 組織置於(yu) 培養(yang) 皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為(wei) 全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存於(yu) -70℃,避免反複凍融。
Ⅱ 培養(yang) 細胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yang) 的細胞，吸去培養(yang) 基後，加入10mL/150mm培養(yang) 板的冷PBS洗兩(liang) 次，每次振搖數次以盡量去除培養(yang) 液；
2． 懸浮培養(yang) 的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yang) 液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yang) 板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩(liang) 次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑製劑， 1μL蛋白酶抑製劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鍾待用。
4． 細胞洗滌後，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配製好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
5．置於(yu) 4℃搖床平台上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為(wei) 全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）
7． 分裝保存於(yu) -70℃,避免反複凍融
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