ELISA結果出現幹擾時,可以通過處理內(nei) 源性幹擾物質、處理外源性幹擾物質、優(you) 化實驗條件等方法來解決(jue) 。
處理內(nei) 源性幹擾物質
類風濕因子:可以使用F(ab)2替代完整的IgG,或者用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理標本。
補體(ti) :使用EDTA稀釋標本,或者加熱滅活C1q。
嗜異性抗體(ti) :可以通過理化方法解離複合物。
嗜靶抗原自身抗體(ti) :測定前需用理化方法將其解離後再測定。
醫源性誘導的抗鼠Ig(s)抗體(ti) :避免使用含有此類抗體(ti) 的標本,或者使用針對人源性抗體(ti) 的二抗。
交叉反應物質:選擇特異性強的抗體(ti) ,或者使用競爭(zheng) 法ELISA。
處理外源性幹擾物質
標本溶血:避免標本溶血,或者使用去蛋白劑去除血紅蛋白。
標本受細菌汙染:對標本進行滅菌處理。
標本保存不當:新鮮采集標本,避免長時間保存,或者使用凍存後的標本時要充分混合。
標本凝集不全:讓血液充分凝固後再分離血清。
標本管中添加物質的影響:避免使用含有幹擾物質的采血管,或者調整實驗條件以消除幹擾。
優(you) 化實驗條件
選擇合適的酶和底物,避免非特異性顯色。
優(you) 化洗滌步驟,去除未結合的抗體(ti) 和抗原。
控製實驗溫度和時間,確保反應條件一致。
以上方法可以幫助解決(jue) ELISA結果中的幹擾問題。在實際操作中,可能需要根據具體(ti) 情況綜合運用多種方法,並通過實驗驗證其有效性。
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