ELISA實驗與hth体育下载地址的關係

ELISA載體(ti) 的外形主要有三種：微量滴定板、小珠和小試管。良好的ELISA板應該是吸附機能好，空缺值低，孔底透明度高，各板之間、統一板各孔之間、統一板各孔之間機能相近。再者，球型小珠的表麵弧度更有利於(yu) 吸附的抗原決(jue) 定簇或抗體(ti) 結合位點的暴露麵處於(yu) zui反應狀態，hth体育下载地址因此珠式ELISA的反應往往更為(wei) 敏捷。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯結多發生在Fc段上，抗體(ti) 結合點暴露於(yu) 外，因此抗體(ti) 的包被一般均采用直接吸附法。 
    疫吸附劑已包被抗原或抗體(ti) 的固相載體(ti) 在低溫（2~8℃）幹燥的前提下一般可保留6個(ge) 月以上。可作ELISA中載體(ti) 的材料良多，zui常用的是聚苯乙烯。以含鐵的磁性微粒作為(wei) ELISA固相載體(ti) ，反應後用磁鐵的吸引進行分離，洗滌利便，hth体育下载地址一般均配以特殊儀(yi) 器。為(wei) 比較不同固相在某一ELISA測定中的優(you) 劣，可應用如下的試驗：用其他免疫學測定方法選出一個(ge) 典型的陽性標本和陰性標本，將它們(men) 進行一係列稀釋後，在不同的固相載體(ti) 上按預定的ELISA操縱步驟進行測定，然後比較結果。小試管還可以當作比色杯，zui後直接放入分光光度計中比色。間接包被的抗原經固相抗體(ti) 的親(qin) 和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大進步，因此含雜質較多的抗原也可采用捕捉包被法，試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重複性亦佳。hth体育下载地址聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質的機能，抗體(ti) 或蛋白質抗原吸附其上後仍留存原來的免疫學活性，加之它的價(jia) 格低廉，所以被普遍采用。蛋白質與(yu) 聚苯乙烯固相載體(ti) 是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與(yu) 固相載體(ti) 表麵的疏水基團間的作用力。控製反應前提，使各孔讀數在吸光度0.8左右。所有單個(ge) 讀數與(yu) 全部讀數的均數之差，應小於(yu) 0%。例如，在檢測抗DNA抗體(ti) 時，需用DNA作為(wei) 包被抗原，而普遍的固相載體(ti) 一般不能直接與(yu) 核酸結合。ELISA板的特點是可以同時進行大量標本的檢測，並可在特製的比色計上迅速讀出結果。換言之，包被等於(yu) 抗原或抗體(ti) 結合到固相載體(ti) 表麵的過程。在哪一種載體(ti) 上陽性結果與(yu) 陰性結果差別zui大，這種載體(ti) 就是這一ELISA測定項目的zui合適的固相載體(ti)  hth体育下载地址包含以下各組分：已包被抗原或抗體(ti) 的固相載體(ti) （免疫吸附劑）；酶標記的抗原或抗體(ti) （結合物）；酶的底物；陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），參考尺度品和控製血清（定量測定中）；酶聯物（結合物）及標本的稀釋液；洗滌液；酶反應終止液。ELISA中有三個(ge) 必要的試劑：免疫吸附劑、結合物和酶的底物等。