如何用Elisay試劑盒檢測抗原

hth体育下载地址是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之後發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用於(yu) 生物學和醫學科學的許多領域。

hth体育下载地址用於(yu) 檢測未知抗原的雙抗體(ti) 夾心法:
.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩衝(chong) 液將抗體(ti) 稀釋至蛋白質含量為(wei) ～0μg/ml。在每個(ge) 聚苯乙烯板的反應孔中加0.ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nei) 溶液，用洗滌緩衝(chong) 液洗3次，每次3分鍾。(簡稱洗滌，下同)。
2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.ml於(yu) 上述已包被之反應孔中，置37℃孵育小時。然後洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.　加酶標抗體(ti) ：於(yu) 各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(ti) (經滴定後的稀釋度)0.ml。37℃孵育0.5～小時，洗滌。
4.　加底物液顯色：於(yu) 各反應孔中加入臨(lin) 時配製的TMB底物溶液0.ml，37℃0～30分鍾。
5.　終止反應：於(yu) 各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.　hth体育下载地址結果判定：可於(yu) 白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nei) 顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為(wei) 無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀(yi) 上，於(yu) 450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調零後測各孔O·D值，若大於(yu) 規定的陰性對照OD值的2.倍，即為(wei) 陽性。

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