PPA製備與使用的基本技術

    將初步純化的SPA與(yu) HRP用過碘酸鈉氧化法（交聯反應時間在22℃下5h）交聯。

    將上述PPA溶液過Sephadex G-00柱，條件同前。所收集的第管至第22管的合並液，是PPA存在的主要組分，可用ELISA塑料平板法檢測活性。將合並液濃縮，然後加入30%左右甘油，貯於(yu) 4℃冰箱備用PPA的使用。hth体育下载地址

    PPA-ELISA法。基本上與(yu) ELISA法相同，PPA代替了酶標抗抗體(ti) 。在進行微量反應板測定時，PPA常常加入0.ml,稀釋度一般在：2至：00（應按不同情況試驗）。PPA與(yu) IgG是化學共價(jia) 結合，反應時間不宜過長，不應超過2h，控製在30min-60min,反應時間過長會(hui) 使PPA吸附到塑料載體(ti) 上去。

    用PPA進行組織內(nei) 有關(guan) 抗原的定位。甲醛對PPA有顯色影響，因此組織不可用甲醛固定，可用甲醛、乙醇等。PPA對組織內(nei) 抗原（先與(yu) IgG結合）的定位，反應時間可以延長，便於(yu) 滲透入組織細胞內(nei) ，且沒發現嚴(yan) 重的物理吸附現象。

    在PPA實驗中稀釋液常用含0.5%（v/v）Tween20的0.02mol/L Ph 7.4 Tris-HC緩衝(chong) 液（2.42gTris溶於(yu) 蒸餾水後用0.N HC調pH至7.4，然後加蒸餾水定容至000ml,zui後加0.5ml Tween 20）。hth体育下载地址

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