傳代細胞內皮細胞-細胞凍存和複蘇實驗原理與注意事項

    按照常規的組織學分類方法，脊椎動物和人體(ti) 細胞類型約有200餘(yu) 種。這些細胞在人體(ti) 中呈現有序的空間分布。細胞是人體(ti) 的結構和功能單位。共約有40萬(wan) －－60萬(wan) 億(yi) 個(ge) ，細胞的平均直徑在0－－20微米之間。除成熟的紅血球外，所有細胞都有一個(ge) 細胞核，是調節細胞作用的中心。zui大的是成熟的卵細胞，直徑在0.毫米以上;zui小的是血小板，直徑隻有約2微米。而75000個(ge) 精子細胞才抵得上一個(ge) 卵細胞的重量。腸粘膜細胞的壽命為(wei) 3天，肝細胞壽命為(wei) 500天，而腦與(yu) 骨髓裏的神經細胞的壽命有幾十年，同人體(ti) 壽命幾乎相等。血液中的白細胞有的隻能活幾小時。

傳(chuan) 代細胞內(nei) 皮細胞-細胞凍存和複蘇實驗原理:

    細胞凍存及複蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以zui大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞(ya) 碸作保護劑，這兩(liang) 種物質能提高 細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內(nei) 的水分滲出細胞外，減少細胞內(nei) 冰晶的形成，從(cong) 而減少由於(yu) 冰晶 形成造成的細胞損傷(shang) 。複蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內(nei) 即融化，避免 由於(yu) 緩慢融化使水分滲入細胞內(nei) 形成胞內(nei) 再結晶對細胞造成損傷(shang) 。

傳(chuan) 代細胞內(nei) 皮細胞-細胞凍存和複蘇實驗注意事項:

. 從(cong) 增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yang) 細胞都可以用於(yu) 凍存，但為(wei) 對數生細胞。在凍存 前一天換一次培養(yang) 液。

2. 將凍存管放入液氮容器或從(cong) 中取出時，要做好防護工作，以免凍傷(shang) 。

3. 凍存和複蘇用新配製的培養(yang) 液。

傳(chuan) 代細胞內(nei) 皮細胞-凍存和複蘇的原則：

    慢凍快融 當細胞冷到零度以下，可以產(chan) 生以下 變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質濃度升高，並在細胞內(nei) 形成冰晶。 如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水 ，細胞內(nei) 不致產(chan) 生大的冰晶;相反，結晶就大，大結晶會(hui) 造成細胞膜、綱胞器的損傷(shang) 和破裂。複蘇過程應快融，目 的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。