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人鑰孔蟲戚血藍蛋白酶聯免疫試劑盒操作步驟

發布時間:2023-08-17      點擊次數:358

      IgG人鑰孔蟲戚血藍蛋白酶聯免疫試劑盒試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中IgG表達。用純化的IgG抗體(ti) 包被微孔板,製成固相抗體(ti) ,可與(yu) 樣品中IgG相結合,經洗滌除去未結合的抗原和其他成分後再與(yu) HRP 標記的IgG抗體(ti) 結合,形成抗體(ti) 抗原 酶標抗體(ti) 複合物,經過徹底洗滌後加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀(yi) 在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),與(yu) CUTOFF 值相比較,從(cong) 而判定標本中IgG的存在與(yu) 否。

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人鑰孔蟲戚血藍蛋白酶聯免疫試劑盒操作步驟:


1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其餘(yu) 各步操作相同)


2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50%l。然後在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40%l,然後再加待測樣品 10%l。加樣將樣品加 於(yu) 酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,


3. 溫育:用封板膜封板後置 37℃溫育 30 分鍾。


4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋後備用


5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體(ti) ,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒後棄去,如此重複 5 次,拍幹。


6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50%l,空白孔除外。


7. 溫育:操作同 3。


8. 洗滌:操作同 5。


9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,再加入顯色劑 B50%l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鍾.

10. 終止:每孔加終止液 50%l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。


11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液後 15 分鍾以內(nei) 進行。


IgG人鑰孔蟲戚血藍蛋白酶聯免疫試劑盒

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