植物1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）試劑盒操作步驟

植物1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）試劑盒操作步驟:

  從(cong) 室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條，剩餘(yu) 板條用自封袋密封放回4℃。

  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

  樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體(ti) 100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

  棄去液體(ti) ，吸水紙上拍幹，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍幹，如此重複洗板5次（也可用洗板機洗板）。

  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

  每孔加入終止液50μL，15min內(nei) ，在450nm波長處測定各孔的OD值。

實驗結果計算

以所測標準品的OD值為(wei) 橫坐標，標準品的濃度值為(wei) 縱坐標，在坐標紙上或用相關(guan) 軟件繪製標準曲線，並得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。