少突膠質細胞生長因子5mL品牌注意事項

少突膠質細胞生長因子5mL品牌注意事項:

1) 由於(yu) 細胞凋亡是一個(ge) 快速的過程，建議樣品在染色後1小時之內(nei) 進行分析。

2) 對於(yu) 貼壁細胞，消化是一個(ge) 關(guan) 鍵步驟。貼壁細胞誘導細胞凋亡時如有漂浮細胞，需收集漂浮細胞和貼壁細胞後合並染色。處理貼壁細胞時要小心操作，盡量避免人為(wei) 的損傷(shang) 細胞。胰酶消化時間過短，細胞需要用力吹打才能脫落，容易造成細胞膜的損傷(shang) ，PI攝入過多；消化時間過長，細胞膜同樣易造成損傷(shang) ，甚至會(hui) 影響細胞膜上磷脂酰絲(si) 氨酸與(yu) Annexin V-FITC的結合。消化時將胰酶鋪滿孔板底後，輕搖時胰酶與(yu) 細胞充分接觸，然後倒掉大部分胰酶，利用剩餘(yu) 的少量胰酶再消化一段時間，待細胞間空隙增大，瓶底呈花斑狀即可終止。在消化液中盡量不用EDTA，EDTA會(hui) 影響Annexin V與(yu) PS的結合。

3) 實驗中如需要固定細胞，比如在檢測凋亡的同時檢測細胞周期，隻能選用Annexin V-FITC，而不能選用Annexin V-EGFP，因為(wei) 在固定過程中EGFP會(hui) 變性導致喪(sang) 失激發熒光的能力。固定前需要先將細胞與(yu) Annexin V-FITC進行孵育，並用binding buffer洗掉未結合的Annexin V-FITC。因為(wei) 固定過程中細胞通透性增加會(hui) 產(chan) 生細胞碎片，可以和Annexin V結合，對結果產(chan) 生幹擾。

4) 如果樣品來源於(yu) 血液，請務必除去血液中的血小板。因為(wei) 血小板含有PS，能與(yu) Annexin V結合，從(cong) 而幹擾實驗結果。可以使用含有EDTA的緩衝(chong) 劑並在200 g離心洗去血小板。

5) 試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nei) 壁上的液體(ti) 甩至管底，避免開蓋時液體(ti) 灑落。

6) Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。

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