歡迎來到hth体育网址網站！
谘詢電話：18321818584歡迎來到hth体育网址網站！谘詢電話：18321818584
產(chan) 品分類
Product Category相關(guan) 文章
Related Articles詳細介紹
公司所有產(chan) 品僅(jin) 供科學實驗，不做其他科學實驗外的使用！
產(chan) 品名稱 | 規格 | 貨號 |
HCT-15 (人結直腸腺癌細胞) | 1×10⁶/T25培養(yang) 瓶 | GOY-01X0096 |
商品詳情：
名稱；HCT-15 (結直腸腺癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱 HCT-15; HCT15
種屬 人類
年齡（性別） 男性
組織來源 結直腸腺癌
生長特性 貼壁細胞
細胞形態 上皮細胞樣
背景描述 DNA指紋鑒定證據表明，HCT-15細胞和DLD-1細胞來源於(yu) 同一個(ge) 人；但同工酶及細胞染色體(ti) 組型分析仍存疑問。HCT-15細胞呈CSAp陰性(CSAp-)；HCT-15角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
生物安全等級 1
生長培養(yang) 基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳(chuan) 代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~20-25小時
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養(yang) 基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yang) 條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).
基因表達情況 carcinoembryonic antigen (CEA) 5.4 ng/10^6 cells/10 days. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.
細胞培養(yang) 步驟：
一、HCT-15 (人結直腸腺癌細胞)複蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yang) 基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鍾，棄去上清液，補加4-6mL培養(yang) 基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養(yang) 瓶中培養(yang) 過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yang) 過夜。第二天換液並檢查細胞密度。
二、細胞傳(chuan) 代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang) 。
a）、 對於(yu) 貼壁細胞，傳(chuan) 代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yang) 上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu) 培養(yang) 瓶中，置於(yu) 37℃培養(yang) 箱中消化1-2min，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養(yang) 瓶後加5ml以上含10%血清的培養(yang) 基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，脫落後吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鍾，棄去上清液，補加1-2mL培養(yang) 液後吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yang) 液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yang) 液的新皿中或者瓶中。
b）、對於(yu) 懸浮細胞，傳(chuan) 代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鍾，棄上清液，補加1-2ml培養(yang) 液後吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yang) 基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄半數培養(yang) 基後，將剩餘(yu) 細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yang) 基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞後，用75%酒精噴灑整個(ge) 管子消毒後放到超淨台或安全櫃內(nei) ，嚴(yan) 格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yang) 瓶或6cm培養(yang) 皿，加入5ml左右培養(yang) 基混勻，放入培養(yang) 箱過夜培養(yang) 後查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養(yang) ，視情況傳(chuan) 代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳(chuan) 代（方法同上）。
三、細胞凍存：
1、細胞生長至覆蓋培養(yang) 瓶的80%麵積時，棄25cm2培養(yang) 瓶中的培養(yang) 液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yang) 瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後加入培養(yang) 液終止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然後將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細胞，並放置於(yu) 凍存管中；
4、先將細胞凍存管放置於(yu) -20℃ 1.5h，然後將其移入-80℃
產(chan) 品谘詢
電話
微信掃一掃
聯係人：銷售部
地址：上海市嘉定區澄瀏公路52號盛創企業
郵箱：3004918891@qq.com
手機：18321818584 / 15026555973