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使用方法:
一、樣品 RNA 的製備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意：可以選用本公司生產(chan) 的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆轉錄）反應合成 cDNA
. 按下表配製 RT 反應體(ti) 係（20 μL 體(ti) 係）
2. 70℃保溫 5 分鍾變性模板後立即冰浴。
3. 嚴(yan) 格按順序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆轉錄酶（含 RI），
反應終體(ti) 積為(wei) 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鍾。此步為(wei) RT 反應。
5. 70℃保溫 0 分鍾以終止反應，然後放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為(wei) PCR 模板使用，丌需要純化。
產(chan) 品名稱：沙雷菌通用PCR檢測試劑盒供應商
英文名稱：Serratia spp.PCR
規格：詳見說明書(shu)
類別:PCR檢測試劑盒
運輸：低溫、避光、快遞免費送貨上門。
用途：生化實驗，合成實驗等試驗。
運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存, 保存期限為(wei) 6 個(ge) 月。
自備試劑：樣品 RNA。
性能指標：點擊了解更多。
.試劑盒檢測特異性為(wei) 00%
2. 檢測試劑盒重現性為(wei) 00%
3. 靈敏度可達到03/ml
4. 有效期為(wei) 6個(ge) 月
注意事項：
①加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用幹淨的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書(shu) 中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露於(yu) 光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成後應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍幹，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉汙染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書(shu) 儲(chu) 存，使用前恢複到室溫。稀稀過後的標準品應丟(diu) 棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關(guan) 鍵，PCR 產(chan) 物的特異性取決(jue) 於(yu) 引物與(yu) 模板DNA互補的程度。理論上，隻要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體(ti) 外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 5-30bp，常用為(wei) 20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為(wei) 宜，特定條件下可擴增長至0kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為(wei) 宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個(ge) 以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nei) 部出現二級結構，避免兩(liang) 條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會(hui) 形成引物二聚體(ti) ，產(chan) 生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個(ge) 堿基，應嚴(yan) 格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與(yu) 核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.～umol或0～00pmol，以低引物量產(chan) 生所需要的結果為(wei) 好，引物濃度偏高會(hui) 引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體(ti) 的機會(hui) 。
pHY300英文名(EN)：4-Hydroxyphenylacetamide,95%CAS No.：794-82-0規格(SP)：25G類別(Key)：通用試劑
pHY43英文名(EN)：N-Methylformamide,98%CAS No.：23-39-7規格(SP)：00ML類別(Key)：通用試劑
pIC英文名(EN)：Poly(acrylamide-co-diallyldimethylammo...CAS No.：26590-05-6規格(SP)：00ML類別(Key)：通用試劑
pIEXBac-英文名(EN)：Ethionamide,98%CAS No.：536-33-4規格(SP)：5G類別(Key)：通用試劑
pIE-neo英文名(EN)：2-Thiopheneethylamine,96%CAS No.：30433-9-規格(SP)：G類別(Key)：通用試劑
pIEXBac-c-EGFP-英文名(EN)：3-Chloro-2-methylaniline,99%CAS No.：87-60-5規格(SP)：00G類別(Key)：通用試劑
pIEXBac-c-EGFP-2英文名(EN)：2,6-Difluorobenzamide,97%CAS No.：8063-03-規格(SP)：25G類別(Key)：通用試劑
pIEXBac-c-EGFP-3英文名(EN)：Tectoridin (≥98%,HPLC)CAS No.：42553-65-規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
pIEXBac-c-EGFP-4英文名(EN)：Crocin I (≥98%,HPLC)CAS No.：Null規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
PiggyBac 3’LTR英文名(EN)：Crocin II (≥98%,HPLC)CAS No.：55750-84-0規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
PiggyBac 5’LTR英文名(EN)：Morin hydrate (≥98%,HPLC)CAS No.：480-6-0規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
PiggyBac Dual Promoter英文名(EN)：D-(-)-Quinic acid (≥98%,HPLC)CAS No.：77-95-2規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
pIJ8860英文名(EN)：catalpol (≥98%,HPLC)CAS No.：245-24-9規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
pADEasy-/BJ583英文名(EN)：Phlorizin (≥98%,HPLC)CAS No.：60-8-規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
pIK英文名(EN)：Ecdysterone (≥98%,HPLC)CAS No.：5289-74-7規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
pIL253英文名(EN)：6-gingerol (≥98%,HPLC)CAS No.：2353-4-6規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
pIND英文名(EN)：Ligustilide (≥98%,HPLC)CAS No.：443-0-0規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
PINDCSPD英文名(EN)：-Deoxynojirimycin (≥98%,HPLC)CAS No.：930-96-2規格(SP)：20MG類別(Key)：標準品
沙雷菌通用PCR檢測試劑盒供應商藥品，藥及其代謝物同位素標記標準品列表250ml國產(chan)
一級目錄：色譜標準品和試劑二級目錄：臨(lin) 床藥品和代謝物標準品0×LGibco
製冷劑，氟利昂等標準品0×LGibco
GPC標定標準品0×LGibco
EPA508 6組分有機氯藥混標0×LGibco
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