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乙酰輔酶A測試盒紫外分光光度法
50 管/48 樣 25管/24樣 10管/9樣
正式測定前務必取 2-3 個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定
測定意義(yi)
乙酰輔酶 A 廣泛存在於(yu) 動物、植物、微生物和培養(yang) 細胞中。是生物體(ti) 能源物質代謝過程中
產(chan) 生的一種重要的中間代謝產(chan) 物。在體(ti) 內(nei) 能源物質代謝中是一個(ge) 樞紐性的物質。糖、脂肪、
蛋白質三大營養(yang) 物質通過乙酰輔酶 A 匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環和氧化磷酸
化，經過這條通路徹底氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用於(yu) ATP 合成。此外，乙酰輔酶
A 是合成脂肪酸，酮體(ti) ，膽固醇及其衍生物等生理活性物質的前體(ti) 物質。
測定原理
蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和 NAD 生成草酰乙酸和 NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶 A
和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶 A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯反應，乙酰輔酶 A
含量和 NADH 的生成速率成正比，340nm 下吸光值的上升速率反應了乙酰輔酶 A 含量的高
低。
需自備的儀(yi) 器和用品
紫外分光光度計、水浴鍋、台式離心機、可調式移液器、1 mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸
餾水。
試劑的組成和配製
試劑一：液體(ti) 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1 支，-20℃保存。臨(lin) 用前加入 500μL 試劑五充分溶解備用；用不完的試劑分
裝後-20℃保存，禁止反複凍融。
試劑三：液體(ti) 20μL×1 支，4℃保存。臨(lin) 用前加入 500μL 試劑五充分溶解備用；用不完的試
劑分裝後-20℃保存，禁止反複凍融。
試劑四：粉劑×1 瓶，-20℃保存。臨(lin) 用前加入 45mL 試劑五充分溶解備用；用不完的試劑分
裝後-20℃保存，禁止反複凍融。
試劑五：液體(ti) 60mL×1 瓶，4℃保存。
工作液的配製：臨(lin) 用前請根據擬用工作液體(ti) 積（樣本數×0.92 m L），將試劑二、三和四按
照 1:1:90 的比例混合，或者直接把試劑二和試劑三加入到試劑四中混勻（可以測定 48 樣）；
加樣前置 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴鍋中預熱 30 min；現配現用；
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