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海藻糖6磷酸合成酶(TPS)測試盒紫外分光光度法
50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定
測定意義(yi) ：
海藻糖是由兩(liang) 個(ge) 葡萄糖分子以α，α-1-1 糖苷鍵連接而成的一種非還原雙糖，廣泛存 在於(yu) 細菌、酵母菌、黴菌、食用菌、低等植物、昆蟲、無脊椎動物和高等植物等多種有機體(ti) 中。海藻糖的非還原性決(jue) 定了它對酸、堿、高溫等的穩定性。另外，它本身具有很強的吸水 性，使它在生物體(ti) 內(nei) 具有抗脫水作用，在逆境條件下可通過識別外界刺激、產(chan) 生和傳(chuan) 遞信號、 基因表達和代謝調節來保護植物免受不良環境的傷(shang) 害。 植物體(ti) 內(nei) 主要以葡萄糖為(wei) 底物合成海藻糖，該反應首先在海藻糖-6-磷酸合成酶 （trehalose-6-phosphate synthase，TPS）的作用下，催化尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）和 6- 磷酸葡萄糖反應生成中間產(chan) 物6-磷酸海藻糖，再在海藻糖-6-磷酸磷酸酶 （trehalose 6-phosphate phosphatase，TPP）的作用下去磷酸化，生成海藻糖。因此，測定TPS活性對於(yu) 研究植物逆境具有重要意義(yi) 。
測定原理：
TPS 催化 UDPG 與(yu) G6P 生成海藻糖-6-磷酸，同時產(chan) 生 UDP；UDP 在丙酮酸激酶與(yu) 乳 酸脫氫酶作用下，氧化 NADH 為(wei) NAD+，NADH 的下降速率與(yu) UDP 含量成正比，通過 340nm 吸光度下降速率反映 TPS 活性。
需自備的儀(yi) 器和用品：
分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配製：
提取液：液體(ti) 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：粉劑×1 瓶，-20℃保存；臨(lin) 用前加入 10mL 試劑五溶解，用不完的試劑分裝後-20℃ 保存，禁止反複凍融；
試劑二：粉劑×2 瓶，-20℃保存；臨(lin) 用前每瓶加入 25mL 試劑五溶解；現配現用；
試劑三：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存；臨(lin) 用前加入 0.1mL 試劑五溶解，用不完的試劑分裝後 -20℃保存，禁止反複凍融；
試劑四：100μL×1 瓶，4℃避光保存；臨(lin) 用前低速離心，以防止試劑沾在管壁；
試劑五：液體(ti) 100mL×1 瓶，4℃保存；
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