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輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒可見分光光度法
分光光度法 50 管/24 樣
正式測定前務必取 2-3 個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定
測定意義(yi)
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在於(yu) 動物、植物、微生物和培養(yang) 細胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三 羧酸循環（TCA）的主要氫受體(ti) ，生成的 NADH 經呼吸電子鏈（ETC）傳(chuan) 遞把電子交給氧， 在合成 ATP 的同時，形成大量的 ROS，同時 NADH 再生為(wei) NAD+。糖、脂、蛋白質三大代 謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體(ti) 係完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的 高低可用於(yu) 評價(jia) 糖酵解和 TCA 循環的強弱。較高的 NAD(H)及 NADH/NAD+比值說明細胞 呼吸耗氧量較高，處於(yu) 過氧化狀態。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑製糖酵解和 TCA 循環。另外，NAD+降解產(chan) 物對細胞信號傳(chuan) 導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。
測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中 NAD+和 NADH，NADH 通過 PMS 的遞氫作用，還原 氧化型噻唑藍（MTT）為(wei) 甲瓚，在 570nm 下檢測吸光值；而 NAD+可被乙醇脫氫酶還原為(wei) NADH，進一步采用 MTT 還原法檢測。
需自備的儀(yi) 器和用品
可見分光光度計、台式離心機、移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配製
酸性提取液：液體(ti) 50mL×1 瓶，4℃保存； 堿性提取液：液體(ti) 50mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體(ti) 15 mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體(ti) 4 mL×1 瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×1 瓶，-20 ℃保存，用時加入 4mL 蒸餾水，混勻，用不完的試劑 4℃保存一周；
試劑四：粉劑×1 瓶，4 ℃保存，用時加入 4mL 蒸餾水，混勻，用不完的試劑 4℃保存一周；
試劑五：液體(ti) 1.8mL×1 支，4 ℃保存；
試劑六：液體(ti) 30mL×1 瓶，4 ℃保存；
試劑七：液體(ti) 50mL×1 瓶，4 ℃保存。
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