NAD蘋果酸脫氫酶(NADMDH)測試盒紫外分光光度法
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在於動物、植物、微生物和培養細胞中,線粒體中 MDH 是 TCA
循環的關鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中 MDH 催化草酰乙酸形成蘋果
酸。草酰乙酸是重要的中間產物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH 在細胞多種生
理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭係統、活性氧
代謝和抗病性等。根據不同的輔酶特異性,MDH 分為 NAD-依賴的 MDH 和 NADP-依賴的
MDH,細菌中通常隻含有 NAD-MDH,在真核細胞中,NAD-MDH 分布於細胞質和線粒體
中。
測定原理:
NAD-MDH 催化 NADH 還原草酰乙酸生成蘋果酸,導致 340nm 處光吸收下降。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、台式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL 石英比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配製:
試劑一、提取液 60 mL×1 瓶,在 4℃保存;
試劑二、液體 50 mL×1 瓶,在 4℃保存;
試劑三、粉劑×2 支,-20℃保存;臨用前加入 300μL 蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑
分裝後-20℃保存,禁止反複凍融。
試劑四、粉劑×2 支,-20℃保存;臨用前加入 300μL 蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑
分裝後-20℃保存,禁止反複凍融。
