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澱粉磷酸化酶(SP)測試盒紫外分光光度法
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定
測定意義(yi) :
澱粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是澱粉代謝過程唯一的可逆反應酶,既可催 化澱粉的合成,也可催化澱粉的分解。 在高等植物中,澱粉磷酸化酶(合成方向)主要存在於(yu) 質體(ti) 中,負責延長澱粉的 α-1,4- 葡萄糖鏈的非還原末端;澱粉磷酸化酶(分解方向)主要存在於(yu) 細胞質基質中,催化澱粉中 的 α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chan) 生葡萄糖-1-磷酸,負責葡萄糖鏈的磷酸解,是澱粉代謝過程中的關(guan) 鍵酶。 在植物體(ti) 中,澱粉磷酸化酶分解方向的底物無機磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷 酸濃度幾乎高了兩(liang) 個(ge) 數量級,一般認為(wei) 澱粉磷酸化酶隻催化澱粉的分解,因此,分解方向的 澱粉磷酸化酶具有重要測定意義(yi) 。
測定原理:
澱粉磷酸化酶催化澱粉中的 α-1,4-糖苷鍵與(yu) 無機磷反應產(chan) 生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在 磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chan) 生葡萄糖-6-磷酸,並在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原 NADP+產(chan) 生 NADPH,使 340nm 下吸光值增加。
需自備的儀(yi) 器和用品:
紫外分光光度計、台式離心機、可調式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配製:
提取液:液體(ti) 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體(ti) 50mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨(lin) 用前加入 3mL 水溶解,用不完的試劑分裝後-20℃保存;
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存;臨(lin) 用前加入 3mL 水溶解,用不完的試劑分裝後-20℃保存。

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