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產(chan) 品名稱:血管緊張素轉化酶2(ACE2)活性蛋白(Mouse,小鼠)
物種:Mus musculus
(Mouse,小鼠)
英文名稱:Active
Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)
ACEH; ACEII; ACE-II; Peptidyl-Dipeptidase A; ACE-related carboxypeptidase; Angiotensin-converting enzyme homolog; Metalloprotease MPROT15
型號:GOY-01D3166
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
來源 | 活性蛋白 |
宿主 | E.coli |
亞(ya) 細胞定位 |
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預測分子量 |
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實際分子量 |
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片段與(yu) 標簽 |
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緩衝(chong) 液成份 | 20mM Tris, 150mM NaCl緩衝(chong) 液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM
DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) |
性狀 | 凍幹粉 |
純度 | > 90% |
內(nei) 毒素水平 |
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等電點 | 6 |
應用 | Cellculture;ActivityAssays. |
規格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
Ⅰ 實體(ti) 組織蛋白的提取
1.血管緊張素轉化酶2(ACE2)活性蛋白(Mouse,小鼠)在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑製劑, 1 μL蛋白酶抑製劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鍾待用。
2. 每100mg固體(ti) 組織置於(yu) 培養(yang) 皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為(wei) 全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存於(yu) -70℃,避免反複凍融。
Ⅱ 培養(yang) 細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yang) 的細胞,吸去培養(yang) 基後,加入10mL/150mm培養(yang) 板的冷PBS洗兩(liang) 次,每次振搖數次以盡量去除培養(yang) 液;
2. 懸浮培養(yang) 的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yang) 液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yang) 板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩(liang) 次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑製劑, 1μL蛋白酶抑製劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鍾待用。
4. 細胞洗滌後,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配製好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
5.置於(yu) 4℃搖床平台上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為(wei) 全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法)
7. 分裝保存於(yu) -70℃,避免反複凍融
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