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商品介紹:
測定意義(yi)
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下遊產(chan) 物過氧化物和羥化物等,研究表明,機體(ti) 95%以上的活性氧(ROS)都來自於(yu) 線粒體(ti) ,其失衡所致的氧化應激與(yu) 細胞生長增殖、發育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關(guan) 。
正常情況下,細胞內(nei) 抗氧化防禦係統與(yu) 氧自由基處於(yu) 平衡狀態,細胞內(nei) 活性氧(ROS)水平維持在較低的生理範圍;在病理情況下,細胞內(nei) 抗氧化係統與(yu) 氧自由基的平衡被打破,細胞內(nei) 活性氧水平過多,就可破壞線粒體(ti) 酶類、脂類和核酸,使機體(ti) 出現氧化應激,同時,活性氧還可攻擊線粒體(ti) DNA產(chan) 生氧化損傷(shang) ,導致線粒體(ti) ATP合成減少、線粒體(ti) 膜電位破壞等結構和功能變化。
因此,通過檢測活性氧的變化來判斷線粒體(ti) 的功能是否正常具有重要意義(yi) 。
測定原理:
熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin
diacetate, DCFH-DA)可擴散通過線粒體(ti) 膜,在線粒體(ti) 內(nei) 被酯酶水解,形成無熒光的DCFH,DCFH迅速與(yu) ROS反應生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據上述原理設計了利用熒光法直接定量檢測線粒體(ti) ROS產(chan) 生速率的方法。將熒光強度隨時間變化的數據點擬合,線性回歸直線斜率與(yu) ROS產(chan) 生的速率呈正比。
需自備的儀(yi) 器和用品:
多功能酶標儀(yi) 、恒溫培養(yang) 箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水。

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