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谘詢電話:18321818584試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中NA 表達。用純化的NA 抗體(ti) 包被微孔板,製成固相抗體(ti) ,可與(yu) 樣品中NA 相結合,經洗滌除去未結合的抗原和其他成分後再與(yu) HRP 標記的NA 抗體(ti) 結合,形成抗體(ti) 抗原 酶標抗體(ti) 複合物,經過徹底洗滌後加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀(yi) 在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),與(yu) CUTOFF 值相比較,從(cong) 而判定標本中NA 的存在與(yu) 否。在反應體(ti) 係中,OD 值的高低與(yu) 樣品中 NA(去甲腎上腺素)的含量呈正相關(guan) 。當樣品中 NA 濃度較高時,更多的 NA 會(hui) 與(yu) 固相抗體(ti) 結合,進而吸引更多的 HRP 標記抗體(ti) 參與(yu) 形成複合物,導致在加入底物 TMB 後,藍色產(chan) 物及隨後的黃色產(chan) 物生成量增多,酶標儀(yi) 測得的 OD 值隨之升高。反之,若樣品中 NA 含量低,則形成的複合物數量有限,TMB 轉化效率低,OD 值相應降低。
為(wei) 了確保實驗結果的準確性,還需注意控製實驗條件,如溫度、時間以及試劑的純度與(yu) 濃度,這些因素均可影響酶促反應速率及顏色變化強度,進而影響 OD 值的讀數。此外,設立陽性對照、陰性對照及空白對照,能有效驗證實驗流程的合理性,排除假陽性或假陰性結果的可能性。
通過對多個(ge) 樣本的 OD 值進行統計分析,不僅(jin) 能定性判斷 NA 的存在與(yu) 否,還能在一定程度上實現定量檢測,為(wei) 科研工作者及臨(lin) 床醫生提供關(guan) 於(yu) NA 水平變化的可靠數據支持,有助於(yu) 深入探究 NA 在生理病理過程中的作用機製,以及為(wei) 相關(guan) 疾病的診斷、治療監測提供科學依據。以及為(wei) 相關(guan) 疾病的診斷、治療監測提供科學依據。
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